倒置熒光顯微鏡

由熒光附件等構成的顯微鏡

倒置熒光顯微鏡,是指與一般顯微鏡相比,其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,由熒光附件與顯微鏡有機結合構成的顯微鏡。激發光從物鏡向下落射到標本表面,被反射到物鏡中並聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發光同時進入物鏡,經雙色束分離器使激發光和熒光分開而成像。物鏡和聚光鏡的工作距離很長,能直接對培養皿中的被檢物體進行顯微觀察和研究。適用於土壤微生物培養實驗,具有在培養瓶或培養皿內進行顯微觀察的特點,可以觀察不經染色的透明活體。特別適用於對活體細胞和細胞離體培養等顯微觀察。

構成


倒置熒光顯微鏡 由熒光附件與倒置顯微鏡有機結合構成的,主要用於細胞等活體組織的熒光、相差觀察。倒置顯微鏡(Inverted microscope)是為了適應生物學、醫學等領域中的組織培養、細胞離體培養、浮游生物、環境保護、食品檢驗等顯微觀察。由於這些活體被檢物體均放置在培養皿(或培養瓶)中,這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長,能直接對培養皿中的被檢物體進行顯微觀察和研究。因此,物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,故稱為"倒置顯微鏡"。倒置顯微鏡多用於無色透明的活體觀察,在倒置顯微鏡的基礎上添加一套熒光附件:激光激發塊,熒光光源,熒光照明器,激發塊切換裝置,即可進行倒置熒光觀察。
進口四大品牌顯微鏡都有相應的倒置熒光顯微鏡,如奧林巴斯的IX71倒置熒光顯微鏡,CKX41倒置熒光顯微鏡,尼康Ti系列倒置熒光顯微鏡。國產品牌顯微鏡廠家近年隨著相差技術與熒光成像技術的不斷提升,也推出多款倒置熒光顯微鏡,MSHOT MF51就是一款,其熒光亮度高,且成像清晰,接近國外同類中檔顯微鏡的水準

原理


高信噪比(S/N),能夠捕獲極弱熒光
世界領先的光學品質——對現代生命科學研究至關重要
熒光觀察的理想情況是採用最低量的激發光照射捕獲高對比度的圖像,由此將細胞受損及熒光衰減的機會降至最小。奧林巴斯公司對UIS2系統的物鏡進行精密的設計,使用微弱的激發光即可捕獲明亮的熒光圖像。光透過率進步的同時也提高了UIS2光學系統的信噪比。
倒置熒光顯微鏡的光路原理
倒置熒光顯微鏡的光路原理
干涉鍍膜熒光激發塊的性能改進
熒光激發塊的干涉膜採用了新型鍍膜技術,激髮帶寬(BP)以及熒光帶寬(BA)比傳統譜線縮短了6nm,使信噪比更進一步得到提高。奧林巴斯的熒光激發塊採用硬鍍膜技術,大大延長了激發塊的使用壽命,提高了在潮濕環境中的使用性能。
熒光激發塊的原理
熒光激發塊的原理
熒光蛋白專用高質量熒光激發塊
BX2系列HQ型熒光激發塊最適宜的波長是ECFP/EFP/EYFP/DsRed。高銳化鍍膜以及高透過率(90%-95%)可有效地透過熒光蛋白所發射的熒光。這樣,即使採用微弱的激發光仍可觀察到明亮的圖像,同時,防止熒光衰減,並將細胞受損的可能減至最小。
減少雜散光的功能
當在分光鏡對激發光進行反射時,雜散光的微量透射就可造成雜訊上升。奧林巴斯公司的熒光激發塊經由其獨特的光吸收塗層可吸收99%以上的雜散光,減少信號干擾,獲得高質量圖像。
倒置熒光顯微鏡
倒置熒光顯微鏡
熒光成像用高數值孔徑物鏡
BX2系列具有新研製的PLAPON60XO物鏡的特點,提供了當今普通觀察方法用物鏡最高的數值孔徑(N. A.:1.42),用於熒光成像,同時具有先進的通用特性。除了其突出的熒光信噪比之外,也可進行紫外激發,這在以前的普通顯微鏡是不能做到的。UPLSAPO100×O物鏡在340nm處(紫外)仍然維持著高透過率。