itc

ITC（Isothermal Titration Calorimetry）

是一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法，它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續、準確地監測和記錄一個變化過程的量熱曲線，原位、在線和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息。微量熱法具有許多獨特之處。它對被研究體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件，即具有非特異性的獨特優勢，樣品用量小，方法靈敏度和精確度高（本儀器最小可檢測熱功率2nW，最小可檢測熱效應0.125uJ，生物樣品最小用量0.4ug，溫度範圍2℃-80℃，滴定池體積1.43ml）。實驗時間較短（典型的ITC實驗只需30-60分鐘，並加上幾分鐘的響應時間），操作簡單（整個實驗由計算機控制，使用者只需輸入實驗的參數，如溫度、注射次數、注射量等，計算機就可以完成整個實驗，再由Origin軟體分析ITC得到的數據）。測量時不需要製成透明清澈的溶液，而且量熱實驗完畢的樣品未遭破壞，還可以進行後續生化分析。儘管微量熱法缺乏特異性但由於生物體系本身具有特異性，因此這種非特異性方法有時可以得到用特異方法得不到的結果，這有助於發現新現象和新規律，特別適應於研究生物體系中的各種特異過程。

獲得生物分子相互作用的完整熱力學參數，包括結合常數、結合位點數、摩爾結合焓、摩爾結合熵、摩爾恆壓熱容，和動力學參數（如酶活力、酶促反應米氏常數和酶轉換數）。

蛋白質-蛋白質相互作用（包括抗原-抗體相互作用和分子伴侶-底物相互作用）；蛋白質摺疊/去摺疊；蛋白質-小分子相互作用以及酶-抑製劑相互作用；酶促反應動力學；藥物-DNA/RNA相互作用；RNA摺疊；蛋白質-核酸相互作用；核酸-小分子相互作用；核酸-核酸相互作用；生物分子-細胞相互作用；……

加樣體積：（實際體積）

徠cell：1.43ml，syringe：300μl

準備樣品體積（最少量）

cell：2ml，syringe：500μl