巴氏小體

以後研究表明，巴氏小體就是性染色體異固縮（細胞分裂周期中與大部分染色質不同步的螺旋化現象）的結果。體育運動會上的性別鑒定主要採用巴氏小體方法。

英國學者萊昂（M.F.Lyon）認為，這種異固縮的X染色體（巴氏小體）缺乏遺傳活性，提出“萊昂氏假說”，其內容主要是：

（1）正常雌性哺乳動物體細胞中的兩個X染色體之一在遺傳性狀表達上是失活的；

（2）在同一個體的不同細胞中，失活的X染色體可來源於雌性親本，也可來源於雄性親本；

（3）失活現象發生在胚胎髮育的早期，一旦出現則從這一細胞分裂增殖而成的體細胞克隆中失活的都是同一來源的染色體。巴氏小體的數目及形態可通過顯微鏡觀察得知，如可從人的口腔內刮取少許上皮細胞或取頭髮的髮根，經染色處理后即可看到。巴氏小體直徑約1微米，位於細胞核周緣部，略呈三角形、尖端向內。通過巴氏小體檢查可確定胎兒性別和查出性染色體異常的患者，如克氏（Klinefelter′s）綜合征患者外貌為男性，但有一個巴氏小體，可判定患者的核型是47，XXY；而外表為女性的特納氏（Turner's）綜合征患者卻無巴氏小體，故判斷患者的核型是45，XO。其他性染色體異常的患者如XXY、XXYY有1個巴氏小體，而XXX、XXXY有2個巴氏小體等。巴氏小體的數目=X染色體數目-1。

很多的實驗證據都支持萊昂假設。如人類有一種X-連鎖的異常叫做無汗性外胚層發育不良（anhidrotic ectodermal dysplasia），本病主要表現為毛髮稀少，牙齒髮育異常，無汗或少汗，以及表皮和附件異常。攜帶的（基因型為雜合子的）女性表現出來有齒和無齒顎區的嵌鑲以及有汗腺和無汗腺皮膚的嵌鑲。這兩種嵌鑲的位置在個體之間明顯不同，這是由於發育期一條X染色體隨機失活所致。

三色貓（又叫做三玳瑁貓）也是一個很好的例子。雌性的三色貓腹部的毛是白色的，背部和頭部的皮毛由桔黃色和黑色斑組成，十分漂亮。這種雌貓是一個X-連鎖基因雜合體，X-連鎖的b基因控制橙色（orange）毛皮，其等位基因B是控制黑色的毛皮。帶有b基因的X染體若失活，B基因表達產生黑色毛斑，若帶有B基因的X染色體若失活，b基因表達則產生橙黃色毛斑。

X-連鎖的6-磷酸葡糖脫氧酶(G-6-PD)的測定也為萊昂假設提供了有力證據。女性雖然有二條X染色體，但其G-6-PD活性和男性的相同，表明其X染色體的總量有一半是失活的，這正好說明了劑量補償作用。G-6-PD有A，B兩種類型，二者之間只有一個氨基酸的差異，但電泳帶的遷移率不同，A帶比B帶移動得快一點。它們分別由一對等位基因GdA和GdB編碼的。GdA或GdB純合的女人從各種組織取樣進行電泳分析都只出現一條電泳帶。GdA/GdB雜合的女人電泳的結果卻會出A、B兩條帶。但用胰酶處理雜合體的皮膚細胞，使其分成單個細胞，然後進行克隆培養，每個克隆都來一個單細胞，再從各個克隆中取樣進行電泳發現，每個克隆只出現一條電泳帶非A即B，非B即A，而絕不出現二條帶。表明細胞中雖有一對等位基因GdA/GdB的存在，但由於有一條X染色體失活，使其上的等位基因不能表達，所以只出現一條帶。雖然大量的證據表明了萊昂假設的正確性，但仍存在一些問題。

比如既然女人只有一條X染色體是有活性的，那麼XXX和XO的女性也只有一條X染色體有活性，那麼為什麼會出現異常呢？1974年Lyon又提出了新萊昂假說，認為X染色體的失活是部分片段的失活，這就能很好地解釋以上的矛盾。現在已經查明在失活的X染色體上決定一種血型的Xg基因就仍然保持著活性。

從生物倫理學以及出生人口性別構成等相關問題出發，嚴禁非醫學需要鑒定胎兒性別以及選擇性別終止妊娠。

早在1949年，巴爾便發現了男女細胞在性染色體上的差別。巴爾採用一種非常簡便的方法，即用女性的口腔粘膜或陰道粘膜塗片，經染色后在光學顯微鏡下觀察，發現間期細跑的細胞核內有一個約1.2×0.7微米大小、靠近核膜的濃縮染色質塊，其數目比 X染色體數目少一個，正常女性細胞有2個 X染色體，而只有一個性染色質，稱為女性性染色質，又叫巴爾小體（巴氏小體）。而男性因為只有一個X染色體，故無這種染色質塊，但男性細胞經用芥子喹嚀因或熒光阿的平的酒精溶液染色，在熒光顯徽鏡下，可看到閃爍熒光的 y小體，直徑約0.3微米大小，又稱男性染色質。只要有一個y染色體，便有一個y小體。這樣，巴爾小體和 y小體就把男女性別通過體細胞染色體檢查區別得一清二楚，同時，也為性染色體病的檢出提供了新方法。那麼，對未降生的胎兒又是如何及早預知雌雄，以便決定取捨呢?

隨著科學技術的進步，近幾十年，科學工作者對胎兒性別的宮內診斷做了大量工作，國內外有關這方面的報道也不少。把這些方法歸納起來，檢查的材料有羊水細胞、胎盤絨毛膜細胞（妊娠早期）以及最近採用孕婦的血、尿、宮頸粘液等。檢查的方法有 x性染色體、嗜中性粒細胞鼓縋體、性染色體、y熒光小體、微量免疫擴散法等。

預測胎兒性別最理想的要求，應當取材容易，操作簡單安全，孕早期即能診斷，而且正確率要高。以上方法各有優缺點。

方法：

1、取材：用牙籤刮少許口腔粘膜細胞

2、塗片：將刮取物均勻地塗在乾淨的載玻片上，使成一薄層，空氣中乾燥。

3、固定：卡諾固定液（新配製，冰乙酸：乙醇=1：3）中固定15～20分鐘，取出自然晾乾。

4、酸解：在載玻片上滴加5mol/L鹽酸，處理2～3分鐘，清水洗滌。

5、細胞染色：滴加幾滴甲苯胺藍染色液染色30分鐘，染色結束后，用清水洗掉浮色，空氣中自然乾燥。

6、顯微鏡觀察（男性有巴氏小體的細胞為1%，而女性則高達30%）

缺點：無法鑒定XO型細胞。