酶免疫測定
酶免疫測定
酶免疫測定是一種在液相內微量物質的定量測定方法。用酶標記已知抗體或抗原,與待測抗原或抗 體材料混合反應后,再加入酶的底物顯色,使用分光光度計根據呈色程度己測定待測物 的含量。EIA又根據抗原抗體反應后是否需 要將遊離的和與抗原(抗體)結合的酶標記 物分離,而分為均相酶免疫測定和非均相(或異 相)酶免疫測定兩種類型。非均 相酶免疫測定 根據是否使用固相支持物作為抗體(抗原)的載體,又可分為液相和固相酶免疫測定兩 種類型。固相酶免疫測定技術中,分離結合 標記物和遊離標記物最常用的分離方法是采 用固相吸附法,也稱酶聯免疫吸附實驗是目前最常用的酶標免疫技術。 (賴江華)
目錄
酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應的特異性相結合的一種微量分析技術。酶標記抗原抗體后形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標記抗原抗體複合物。利用複合物上標記的酶催化底物顯色,其顏色深淺與待測樣品中抗原或抗體的量相關。該方法靈敏度可達到ng~pg/ml水平。常用的標記物有辣根過氧化物酶HRP和鹼性磷酸酶AP等。
酶免疫測定分為 酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和 酶免疫組化技術(enzyme immunohistochemistry technique),前者用於測定可溶性抗原或抗體,後者用於測定組織或細胞表面的抗原。