精子頂體酶
存在於精子頂體內膜及赤道部膜上
頂體徠酶存在於精子頂體內膜及赤道部膜上,通常以無活性形式存在,當精子頭部進入卵透明帶時,頂體酶原才被激活為頂體酶。此酶是受精過程中不可缺少的一種中性蛋白水解酶,其作用類似於胰蛋白酶,它能水解卵透明帶糖蛋白,使精子穿過卵丘再穿過透明帶,使精子與卵子融合;它還能促使生殖道中激肽釋放,從而增強精子的活力和促進精子的運動。
(36.72±21.43)U/L(BAEE-ADH法)。
頂體酶對於精子的運動和受精過程都是不可缺少的,頂體酶活力不足可導致男性不育。因此精子頂體酶活性測定可作為精子受精能力和診斷男性不育症的參考指標。
徠結果偏低可能疾病:男性不育症。
頂體酶還能促進生殖系統中激肽的釋放,從而增強精子的活力和促進精子的運動。頂體酶活力不足可導致男性不育。
(1)精子的洗滌和頂體酶的提取:取0.25ml液化的精液於塑料離心管中,以500×g離心5min;棄上清,將離心管在吸水紙上倒置,以除去剩餘溶液,再加0.25ml 2%的醋酸溶液,放4℃冰箱內抽提過夜(16~24h),取出后以1000×g離心10min,取上清備用。
(2)測定過程:在比色杯內依次加入用pH8.7 0.05mol/L Tris-HCl緩衝液新鮮配製的NAD(1mg/ml)0.1ml,BAEE1mg/ml 0.5ml,ADH(3.46mg/ml)0.1ml和Tris-HCl緩衝液2.25ml,均勻混合后25℃下預溫5min,再加入0.05ml頂體酶抽提液立即混合均勻,記錄加入酶液后10min,反應液在366nm下吸光度的變化值(△A366mm/10min)。
(3)酶活力單位的定義和酶活力的計算:1個毫單位(mu)的頂體酶活力等於在上述反應條件下(pH8.5和25℃),每分鐘水解1nmol/L的BAEE所需要的頂體酶量。水解1nmol/L的BAEE使反應液的吸光度變化0.0011,t是反應時間(10min),△A是在t分鐘內吸光度的變化值,V是加入酶液的體積(0.05ml),因為抽提液的體積和原始精液體積相同,所以,公式計算的就是每毫升精液內的頂體酶活力。
無。
無。