分配層析法

分配層析法

分析化學領域,當人們廣泛地試用吸附劑進行層析分析的時候,液-液萃取分離在金屬分離上已經得以廣泛應用。這種方法是馬丁和辛格在1941年發明的,這種方法是用硅膠進行吸附水,水重為硅膠自身重量的50%,再裝成柱體,然後將氨基酸混合物的溶液加到柱體上,這時用含少量丁醇的氯仿進行層析。這種方法可以使氨基酸分離,這一方法迅速興起,人們稱之為分配層分析法。這種方法的原理是利用了被分離物質在兩相中分配係數的差別。

在上述試驗中,硅膠被馬丁和辛格稱作擔體,它在分配層析中只起負擔固定液的作用,基本上呈惰性。吸著在硅膠印的液體,被稱為靜止相;氯仿液被稱作流動相。馬丁在1941年的論文中,發表了這一方法的理論根據。

極性有機混合物分離中的應用


分配層法在試驗中克服了吸附色層法遇到的困難。比如,脂肪酸和多元醇等極性物質強烈地被一般吸附劑的吸附,即使利用洗脫能力極強的液體進行洗脫也無濟於事,因而不能用吸附色層法將它們分離出來。而分配層析法則很容易將這些脂肪酸一類的極性物質分離出來。因此,這一方法在極性有機混合物的分離上迅速得到了廣泛的應用,取得了良好的效果。這一方法一般以水、稀硫酸甲醇極性溶劑作為靜止相,以非極性成弱極性物質作為流動相。1948年,摩爾和斯坦思用分配層析法從澱粉中分離了一些氨基酸。呼伍等人在同年用纖維素柱分離了糖類。

紙上層析法


後來,在試驗中,馬丁發現在水蒸氣飽和的空氣中,濾紙吸附約22%的水分之後,也可以在分配層析法中用作靜止相的支撐物,這是1944年的事情。由此,形成了分配層析法中重要的一支-紙上層析法。這種方法很快應用到對酚類、脂肪酸、氨基酸、染料、糖類、甾類化合物、肽類以及蛋白質、核糖等複雜有機物的分析上,成為生物化學中最重要的分離和分析方法之一。在無機物質的分析紙上分析法至今仍然只作為一種輔助手段。
分配層析法的出現,使分析化學又多一隻“手”,它對於複雜有機物及無機物的分析都相當有效。