化學發光
物質在進行化學反應過程中伴隨的光輻射現象
化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象,可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應,有兩個關鍵步驟組成:即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質,反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*,處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這裡C*是發光體,此過程中由於C直接參與反應,故稱直接化學發光。
間接發光又稱能量轉移化學發光,它主要由三個步驟組成:首先反應物A和B反應生成激發態中間體C*(能量給予體);當C*分解時釋放出能量轉移給F(能量接受體),使F被激發而躍遷至激發態F*;最後,當F*躍遷回基態時,產生髮光。
化學發光
化學發光分析測定的物質可以分為三類:第一類物質是化學發光反應中的反應物;第二類物質是化學發光反應中的催化劑、增敏劑或抑製劑;第三類物質是偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑等。這三類物質還可以通過標記方式用來測定其他物質,進一步擴大化學發光分析的應用範圍。
化學發光反應的發光類型通常分為閃光型(flashtype)和輝光型(glowtype)兩種。閃光型發光時間很短,只有零點幾秒到幾秒。輝光型又稱持續型,發光時間從幾分鐘到幾十分鐘,或幾小時至更久。閃光型的樣品必須立即測量,必須配以全自動化的加樣及測量儀器。輝光型樣品的測量可以使用通用型儀器,也可以配有全自動化儀器。
化學發光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA),是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合,用於各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之後發展起來的一項最新免疫測定技術。
化學發光定量檢測相比酶聯免疫是定性檢測,在臨床治療上具有重大意義。以HBsAg的檢測為例,如果採用化學發光法,可以將定量結果<=100IU/mL作為停葯指標,並定期隨訪檢測HBsAg定量值。
酶聯免疫與化學發光的比較
酶聯免疫 | 化學發光 | |
原理 | 將醫用酶同樣本反應,根據反應物顏色的變化程度分析各類指標,確定診斷結果 | 將抗原抗體同樣本結合,然後由磁珠捕捉形成的反應物,再加入發光促進劑,加大反應物自發光速度和強度,用發光信號測量儀測量光子數量,據此診斷 |
優點 | 技術成熟,成本最低 | 精確度高,無污染,檢測速度快,技術日益成熟 |
缺點 | 操作複雜,耗時長,反應試劑殘留存在放射性污染 | 成本相對高,技術成熟度在國內相對弱 |
發展方向 | 目前是國內主流技術,但未來逐步被化學發光替代 | 代表了免疫診斷的發展方向 |
資料來源:產業信息網整理