固體培養基

固體培養基

在一般培養溫度下呈固體狀態的培養基都稱固體培養基。在液體培養基中加入2%左右的瓊脂,加熱至100℃溶解,40℃下冷卻並凝固,使其成為固體狀態即為固體培養基。

分類


固體培養基可以分為兩類:一類是用天然的固體狀物質製成的,如用馬鈴薯塊、麩皮、米糠、豆餅粉、花生餅粉製成的培養基,酒精廠、釀造廠等常用這種培養基;另一類是在液體中添加凝固劑而製成的,如實驗室中常用的瓊脂固體斜面和固體平板培養基。這種培養基廣泛用於微生物的分離、鑒定、保藏、計數及菌落特徵的觀察等。

原理


固體培養基的凝固劑一般不是微生物的營養成分,只起固化作用。理想的凝固劑應具備以下條件:不會被微生物分解利用;不會因高溫滅菌而受到破壞;在微生物生長的溫度範圍內保持固體狀態;對微生物及操作人員均無毒害作用;透明度好、凝固力強;價格低廉,配製方便。常用的凝固劑是瓊脂。瓊脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,絕大多數微生物都不能分解利用它。瓊脂的熔點為96℃,凝固點為40℃,因此,在一般的培養條件下都呈固體狀態,而且透明度強。正是這些優良特性,使瓊脂取代了早期使用的明膠而成為常用的凝固劑。
呈液體狀態的培養基,叫液體培養基或培養液,發酵液。液體培養基因營養物質分佈均勻,與菌體表面接觸充分,還能大量溶解微生物的代謝產物等優點,廣泛用於微生物的生理、代謝研究以及大規模的工業化生產中。
半固體培養基是指在培養液中加入少量的凝固劑(如0.2%-0.5%的瓊脂)而製成的培養基。這種培養基常用於觀察細菌的運動、厭氧菌的分離和菌種鑒定等。
理想的凝固劑應具備以下條件:①不被所培養的微生物分解利用;②在微生物生長的溫度範圍內保持固體狀態,在培養嗜熱細菌時,由於高溫容易引起培養基液化,通常在培養基中適當增加凝固劑來解決這一問題;③凝固劑凝固點溫度不能太低,否則將不利於微生物的生長;④凝固劑對所培養的微生物無毒害作用;⑤凝固劑在滅菌過程中不會被破壞;⑥透明度好,粘著力強;⑦配製方便且價格低廉。實驗用的凝固劑有瓊脂、明膠和硅膠,後者用於配製自養微生物的固體培養基。對其他多數微生物來講,以瓊脂最為合適,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固體。此培養基可供分離、鑒定、活菌計數、菌種保藏等用。