β-actin由375個氨基酸組成，分子量大小為42-43kDa左右。β-actin作為內參是得到了公認的，這是針對大多數組織和細胞來說的，它廣泛分佈於細胞漿內，表達量非常豐富，其含量占所有細胞總蛋白的50%。但是在一些少量特殊的情況下，如脂肪組織或細胞內，β-Actin的表達量就很少。
β-Actin內參抗體雖然選擇較多，但是也需要遵循一定的原則，並契合實際的應用要求。首先，我們需要考慮目的蛋白的大小，我們推薦
內參要與檢測的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參，由於β-Actin的檢測分子量大約在42kD，因此該內參抗體不是很適合 用於檢測38kD-48kD大小目標蛋白的WB實驗中。另外，雖然β-Actin是最合適的內參抗體之一，但是在某些條件下，一些因素也會導致樣品間β-Actin含量的變化。特別需要注意的是，在
脂肪組織里，β-Actin的表達量非常低，不適合作為內參。