熒游標記

熒游標記

熒游標記技術指利用一些能發射熒光的物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。

原理及特徵


熒光,又作“螢光”,是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能後進入激發態,並且立即退激發併發出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光,而不去仔細追究和區分其發光原理。利用熒光染料與被研究對象(蛋白、多肽等)吸附或共價結合后其熒光特性發生改變,從而反映有關研究對象性能的信息。

種類介紹


熒光素類染料
熒光素類標記試劑包括標準熒光素及其衍生物,如異硫氰酸熒光素(FITC)、羥基熒光素(FAM)、四氯熒光素(TET)等。熒光素異硫氰酸酯(FITC)是一種常用的熒光染料。本文考察了FITC與殼聚糖氨基反應時,溶液pH值、FITC溶劑以及溫度對反應動力學的影響,以期建立一種快速、穩定的製備熒游標記殼聚糖的方法。
羅丹明類染料
羅丹明類染料(rhodamine dye)是生物技術中常用的蛋白質分析染料之一,主要包括R101、四乙基羅丹明(RB200)和羧基四甲基羅丹明(TAMRA)等。與熒光素類衍生物相比,羅丹明類具有更強的光穩定性、更高的熒光產量和更低的pH敏感性。
目前研究比較活躍的標記菁染料主要有兩類,一類是噻唑橙(thiazole orange, TO)、噁唑橙(oxazole orange, YO)系列及其二聚體染料,另一類是多甲川系列菁染料。
其他熒光染料
二苯乙烯、萘醯亞胺、香豆素類吖啶類、芘類等。