高保真Taq酶
高保真Taq酶
高保真Taq酶保真性的一個通用標準是錯配率，錯配率越低保真性越好普通Taq酶的錯配率在10-5鹼基/循環數，而高保真Taq酶錯配率可降到10-6數量級，大大降低了出錯的可能性；它適合對PCR保真性要求較高的實驗，如基因篩選、測序、突變檢測等g活性的酶與普通Taq酶（用於提高擴增效率）混合起來；另一類是單一型的高保真酶。
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高保真Taq酶保真性的一個通用標準是錯配率，錯配率越低保真性越好。
普通Taq酶的錯配率在10鹼基/循環數，而高保真Taq酶錯配率可降到10數量級，大大降低了出錯的可能性；它適合對PCR保真性要求較高的實驗，如基因篩選、測序、突變檢測等。
高保真Taq酶的保真原理是：高保真Taq酶具有3'到5'核酸外切酶的活性，PCR擴增途中如果產生了錯配的鹼基，它可以將其切掉，從而保證了擴增的準確性；需要提醒的是由於此酶具有核酸外切酶功能，往往擴增效率低一些，有的還會降解引物，而且產物一般不宜用TA或UA克隆法克隆。
高保真Taq酶的外切活性會導致PCR反應之後不會加尾，所以如果要進行TA克隆，要先進行PCR產物回收（否則影響加尾），然後回收產物用普通Taq酶72℃保溫一段時間，從而利用普通Taq酶加尾的活性。
目前主要有2類產品：一類是混合型的高保真酶，將帶有Proofreading活性的酶與普通Taq酶（用於提高擴增效率）混合起來；另一類是單一型的高保真酶，這種酶本身有校讀功能Proofreading。