亞硝酸鈉滴定法

（一）定義

以亞硝酸鈉液為滴定液的容量分析法稱為重氮化法（亦亞硝酸鈉法）。

（二）原理

芳香伯胺類藥物，在鹽酸存在下，能定量地與亞硝酸鈉產生重氮化反應。依此，用已知濃度的亞硝酸鈉滴定液滴定（用永停法指示終點），根據消耗的亞硝酸鈉滴定液的濃度和毫升數，可計算出芳伯胺類藥物的含量。

反應式：

（三）滴定條件

1.酸的種類及濃度

（1）重氮化反應的速度與酸的種類有關，在HBr中比在HCl中為快，在或中則較慢，但因HBr的價格較昂，故仍以HCl最為常用。此外，芳香伯胺類鹽酸鹽的溶解度也較大。

（2）重氮化反應的速度與酸的濃度有關，一般常在1～2mol/L酸度下滴定，這是因為酸度高時反應速度快，容易進行完全，且可增加重氮鹽的穩定性。如果酸度不足，則已生成的重氮鹽能與尚未反應的芳伯胺偶合，生成重氮氨基化合物，使測定結果偏低。

當然，酸的濃度也不可過高，否則將阻礙芳伯胺的遊離，反而影響重氮化反應的速度。

2.反應溫度

重氮化反應的速度隨溫度的升高而加快，但生成的重氮鹽也能隨溫度的升高而加速分解。

另外，溫度高時易分解逸失，導致測定結果偏高。實踐證明，溫度在15℃以下，雖然反應速度稍慢，但測定結果卻較準確。如果採用“快速滴定”法，則在30℃以下均能得到滿意結果。

3.滴定速度

快速滴定法：

將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液併入溶液中，繼續緩緩滴定，至永停儀的電流計指針突然偏轉，並持續1分鐘不再回復，即為滴定終點。

4.苯環上取代基團的影響

苯胺環上，特別是在對位上，有其它取代基團存在時，能影響重氮化反應的速度。

（1）親電子基團，如等，使反應加速。

（2）斥電子基團，如等，使反應減慢。

（3）對於慢的重氮化反應常加入適量KBr加以催化。

芳仲胺類化合物，也可用滴定液滴定，但所起反應並不是重氮化，而是亞硝基化，

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反應量的關係仍然是1：1。習慣上把這種測定方法叫做亞硝基化滴定，以別於重氮化滴定。兩種方法統名為亞硝酸鈉法。

（一）指示劑法

1.外指示劑

2.內指示劑

（二）永停法

亞硝酸鈉滴定液

1.配製 間接法配製

2.標定 用基準對氨基苯磺酸標定，以永停法指示終點。

3.貯藏 置玻璃塞的棕色玻瓶中，密閉保存。

1.將滴定管尖端插入液面處進行滴定，是一種快速滴定法。

2.重氮化溫度應在15～30℃，以防重氮鹽分解和亞硝酸逸出。

3.重氮化反應須以鹽酸為介質，因在鹽酸中反應速度快，且芳伯胺的鹽酸鹽溶解度大。在酸度為1～2mol/L下滴定為宜。

4.近終點時，芳伯胺濃度較稀，反應速度減慢，應緩緩滴定，並不斷攪拌。

5.永停儀鉑電極易鈍化，應常用濃硝酸（加1～2滴三氯化鐵試液）溫熱活化。

6.亞硝酸鈉滴定液應於玻塞棕色玻璃瓶中避光保存。

1.芳香族第一胺類藥物。

2.水解后具有芳香第一胺結構的藥物。

3.還原后具有芳香第一胺結構的藥物。

本法的相對偏差不得超過0.3%。

第十章 氮測定法

一、定義

測定化合物中含氮元素量的分析方法稱為氮測定法。

二、原理

將供試品置凱氏燒瓶中，加硫酸、硫酸鉀（或無水硫酸鈉）、無水硫酸銅，加熱裂解，將氮變為銨鹽，然後鹼化反應進行蒸餾使氨釋放，同時用硼酸溶液收集，再用硫酸滴定液滴定，以氮的量計算供試品的含量。

三、測定步驟

（一）消化（或破壞）

1.消化原理

將一定量的樣品與濃硫酸共熱，則有機物中的碳和氫被濃硫酸氧化成和，而氮則轉變成被還原為和。生成的和由溶液中逸去，而則與過量的結合成或保留在溶液中。

為了使有機物的破壞能迅速完全，通常採用升高溫度和加入催化劑兩種辦法。在增高溫度方面常加入不易揮發的無水鹼金屬硫酸鹽（或）以提高濃硫酸的沸點，阻止高溫下濃硫酸的分解。在催化劑方面，常加入少量等催化劑，其中以最常用。

2.消化操作要求

（1）將供試品放入凱氏燒瓶中時，注意勿使供試品粘著瓶頸，如已沾著瓶頸，可在緩緩加硫酸時，用硫酸沖入。

（2）破壞時有部分硫酸蒸發及分解出有毒氣體，故須在毒氣櫃中進行，以免中毒。

（3）使凱氏燒瓶成45o斜置，可防止在加熱過程中供試品液飛濺的損失，防止瓶外的雜質掉入瓶內。

（4）切勿將燒瓶口朝向自己或他人，以防加熱炮沸時濺出傷人。

（5）在凱氏燒瓶口放一小漏斗，有迴流冷凝的作用，防止硫酸的揮發。

（6）開始加熱時，應用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點以下，防止突然高溫時，造成泡沫衝出而遭損失。

（7）等泡沸停止，強熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，除另有規定外，繼續加熱至規定時間，放冷。

（8）有必要時（如瓶壁上部有黑色殘渣），可輕輕轉動或搖動燒瓶，時供試品能充分與硫酸接觸，以保證破壞完全。

（二）蒸餾

1.蒸餾原理

於消化后已冷卻的或溶液中，加入濃NaOH溶液並加熱，可使再遊離出來。

Δ

或

Δ

一般採用通入水蒸氣加熱的辦法使逸出，將逸出的吸收在溶液中。

2.蒸餾操作要求

（1）破壞完成以後的溶液，放冷有白色固體析出，於尚未完全凝固時，緩緩加適量純化水溶解，放冷至室溫。

（2）在鹼化前，先將蒸餾裝置清洗好，安裝好，並檢查不得漏氣。若用水蒸氣蒸餾時，蒸汽發生器已沸騰。

（3）冷凝管的尖端應插入吸收液面下2/3處，使吸收完全，防止倒吸現象。

（4）將足夠量的氫氧化鈉溶液注意使沿瓶壁緩緩流至瓶底，自成一液層，以減少酸鹼作用範圍，待全部裝置妥善後，再使其與酸液混合，否則會因強酸強鹼中和時產生大量的熱而使氨逸出損失。

（5）在常量法直接蒸時，加鋅粒是為防止過熱后出現爆沸，為止爆劑，但必須在加入鹼液后，再加入鋅粒，以免鋅粒與硫酸作用而很快消耗掉。

（6）在半微量法中，在發生水蒸氣的圓底燒瓶中加甲基紅指示液數滴，加稀硫酸使成酸性，是為防止水中含有氨等揮發性鹼性物質隨水蒸氣帶入蒸餾器中，從而進入吸收液影響結果。注意一定不能使用鹽酸等揮發性酸調酸性，防止揮發性酸進入蒸餾器內中和鹼液，或進入吸收液影響結果。

（7）安裝時，圓底燒瓶的蒸氣出口應低於蒸餾器的蒸氣入口，使蒸氣帶起的小水滴再迴流到圓底燒瓶中，防止進入蒸餾器的夾層中降低蒸餾溫度。

（8）圓底燒瓶中加玻璃珠或沸石數粒，以防止產生爆沸現象。

（9）蒸餾開始不可太快，以免蒸出的氨未及吸收而逸失。

（10）加熱的火力應穩定，不能忽大忽小，否則會發生倒吸現象。

（11）蒸餾至規定接受體積時，先將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后，再停止蒸餾。

（12）本法應同時作空白試驗，並將滴定的結果用空白試驗校正。

（三）滴定

然後用硫酸滴定液直接滴定，其反應式為：

在這裡起著固定氨的作用。由於的酸性極弱，它的存在並不干擾滴定。

四、不需有機破壞的含氮藥物

某些含氮藥物（如吡拉西坦中含有醯胺結構），可直接加入氫氧化鈉，加熱水解生成低級胺、氨，蒸餾出來，用硼酸溶液吸收，以硫酸滴定液滴定。

五、注意事項

1.供試品取量應適宜，常量法約相當於含氮量25～30mg，半微量法約相當於含氮量1～2mg，供試品取量太多或太少，都將影響測定結果。

2.取用的供試品如在0.1g以上時，應適當增加硫酸的用量，使消解作用完全，並相應地增加40%氫氧化鈉溶液的用量。

3.樣品裂解時，用直火加熱時間不可過長，加入硫酸鹽的量不可過多，以防硫酸銨分解。

4.因強酸、強鹼中和時會發生大量的熱，使氨逸出損失。中和時應沿器壁緩慢地加入足夠的鹼液，使酸液和鹼液分成兩液層。全部裝置安裝好后再混合。

5.蒸餾時加入鋅粒或沸石為助沸止爆劑，防止強鹼過熱后產生爆沸。

6.冷凝管的尖端應插入吸收液面下處，使吸收完全，防止倒吸現象。

7.蒸餾開始不可太快，以免蒸出的氨未及吸收而逸失。

8.蒸餾結束時，先將冷凝管尖端提出液面，以免液體回吸。

六、使用範圍

有機含氮化合物都可用本法測其含量。根據含氮量的高低可分為常量法和半微量法。

七、允許差

本法的相對偏差不得超過1%。

氧化還原滴定法

亞硝酸鈉在鹽酸存在條件下與具有芳伯氨基化合物發生重氮化反應，定量生成重氮鹽。

滴定條件：

(1) 過量鹽酸：加快反應速度，重氮鹽在酸性條件下穩定，防止偶氮化合物形成；酸度過高會阻礙芳伯氨基遊離

(2)室溫(℃～30℃)條件：溫度過高使亞硝酸逸失，過低反應速度太慢

(3) 滴定時加入kbr作為催化劑

(4)滴定方式：開始時滴定管尖端插入液面下，在攪拌下迅速加入，避免亞硝酸損失。近終點時滴定管提出液面，淋洗、緩慢滴定。

(5) 終點指示法：永停滴定法

亞硝酸鈉滴定液使用基準對氨基苯磺酸標定。