克隆載體通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的DNA作為克隆載體，在載體上插入合適大小的 外源DNA片段，並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組后的載體引入到宿主細胞中，並在宿主細胞中大量繁殖。常見 的載體有質粒、噬菌粒、酵母人工染色體。 (李生斌）
對
載體的要求：①能在宿主細胞中複製繁殖，而且最好要有較高的
自主複製能力。
②容易進入宿主細胞，而且進入效率越高越好。
③容易插入外來
核酸片段，插入后不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點。
④容易從宿主細胞中分離純化出來，這才便於重組操作。
⑤有容易被識別篩選的標誌，當其進入宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列進入宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。這才介於克隆操作