體外翻譯

體外翻譯

有兩種體外翻譯的基本方法:以RNA為模板,或以DNA為模板(即偶聯的轉錄/翻譯)。 RNA模板可以是總RNA、mRNA或體外合成的轉錄子。翻譯系統的選擇雖然不是必須,但一般說,選用真核系統來翻譯真核序列,選用原核系統來翻譯原核序列。

基本介紹


英文是in vitro translation
這是一個生物學的辭彙。有兩種體外翻譯的基本方法:以RNA為模板,或以DNA為模板(即偶聯的轉錄/翻譯)。RNA模板可以是總RNA、mRNA或體外合成的轉錄子。DNA模板可以是一個質粒,或一個PCR/RT-PCR產物,這個PCR/RT-PCR產物在轉錄啟動子和翻譯起點下游含有需要翻譯的基因。選擇哪一個體外翻譯系統取決於許多因素,這些因素包括要翻譯的基因的來源(真核/原核),可提供的模板(如RNA或DNA),和所生產的蛋白質的下游應用。
翻譯系統的選擇
雖然不是必須,但一般說,選用真核系統來翻譯真核序列,選用原核系統來翻譯原核序列。如果一個系統存在功能上或抗原的交叉反應,就得選擇另一個系統。使用微粒體膜進行翻譯后修飾或加工一般只與兔網織紅細胞系統兼容。僅在某些特定條件下麥胚芽翻譯系統才與微粒體膜兼容。