英文名稱：reversed phase high performance liquid chromatography,
定義：由非極性固定相和極性流動相所組成的
液相色譜體系。它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系（正相色譜）相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合硅膠，典型的流動相是
甲醇和
乙腈。RP-HPLC是當今液相色譜的最主要的分離模式，幾乎可用於所有能溶於極性或弱極性溶劑中的有機物的分離。
反相色譜法適於分離非極性，極性或離子型化合物，大部分的分析任務皆由反相色譜法完成。