酶標法

酶標法

酶標法是指使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)來檢測HIV抗體。這種方法是根據酶免疫測定原理髮展的一種技術,其基本方法分三類:間接法、雙抗原夾心法和抗體競爭法。目前國內外主要使用的是第三代(雙抗原夾心法)試劑。血源篩查以第三代ELISA為主,國際上有些國家和地區已經將第四代ELISA試劑(線性免疫酶測定)用於血源篩查。第四代ELISA試劑是最近發展起來的HIV抗原抗體聯合測定試劑,可同時檢測艾滋病的抗原和抗體。與第三代試劑相比,它可以降低血源篩查的殘餘危險度,其確切的臨床效果,還有待進一步評估。

各廠生產的HIV檢側ELISA試劑盒的試驗方法和操作步驟基本相同,只是在作用時間、標記酶的種類、反應底物、樣本加量等方面有所差異。

簡介


酶標法是指使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)來檢測HIV抗體。這種方法是根據酶免疫測定原理髮展的一種技術,其基本方法分三類:間接法、雙抗原夾心法和抗體競爭法。目前國內外主要使用的是第三代(雙抗原夾心法)試劑。血源篩查以第三代ELISA為主,國際上有些國家和地區已經將第四代ELISA試劑(線性免疫酶測定)用於血源篩查。第四代ELISA試劑是最近發展起來的HIV抗原抗體聯合測定試劑,可同時檢測艾滋病的抗原和抗體。與第三代試劑相比,它可以降低血源篩查的殘餘危險度,其確切的臨床效果,還有待進一步評估。
各廠生產的HIV檢側ELISA試劑盒的試驗方法和操作步驟基本相同,只是在作用時間、標記酶的種類、反應底物、樣本加量等方面有所差異。

原理


酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,並牢固地結合形成仍保持活性的免疫複合物。當加入相應底物時,底物被酶催化而呈現出相應反應顏色,顏色深淺與相應抗原或抗體含量成正比。由於此技術是建立在抗原-抗體反應和酶的高效催化作用的基礎上,因此,具有高度的靈敏性和特異性,是一種極富生命力的免疫學試驗技術。