懸浮培養

suspension culture

非貼壁依賴性細胞的一種培養方式。

細胞懸浮於培養基中生長或維持。某些貼壁依賴性細胞經過適應和選擇也可用此方法培養。增加懸浮培養規模相對比較簡單，只要增加體積就可以了。深度超過5mm，需要攪動培養基，超過10cm，還需要深層通入CO2和空氣，以保證足夠的氣體交換。

通過振蕩或轉動裝置使細胞始終處於分散懸浮於培養液內的培養方法。

利用固體瓊脂培養基對植物的離體組織進行培養的方法在植物遺傳實驗中已經得到廣泛的應用。但這種方法在某些方面還存在一些缺點，比如在培養過程中，植物的愈傷組織在生長過程中的營養成分、植物組織產生的代謝物質呈現一個梯度分佈，而且瓊脂本身也有一些不明的物質成分可能對培養物產生影響，從而導致植物組織生長發育過程中代謝的改變而利用液體培養基則可以克服這一缺點，當植物的組織在液體培養基中生長時，我們可以通過薄層震蕩培養或向培養基中通氣用以改善培養基中氧氣的供應。植物細胞的懸浮培養是指將植物細胞或較小的細胞團懸浮在液體培養基中進行培養，在培養過程中能夠保持良好的分散狀態。這些小的細胞聚合體通常來自植物的愈傷組織。

一般的操作過程是把未分化的愈傷組織轉移到液體培養基中進行培養。在培養過程中不斷進行旋轉震蕩，一般可用100～120r/min的速度進行。由於液體培養基的旋轉和震蕩，使得愈傷組織上分裂的細胞不斷遊離下來。在液體培養基中的培養物是混雜的，既有遊離的單個細胞，也有較大的細胞團塊，還有接種物的死細胞殘渣。

在液體懸浮培養過程中應注意及時進行細胞繼代培養，因為當培養物生長到一定時期將進入分裂的靜止期。對於多數懸浮培養物來說，細胞在培養到第18～25d時達到最大的密度，此時應進行第一次繼代培養。在繼代培養時，應將較大的細胞團塊和接種物殘渣除去。若從植物器官或組織開始建立細胞懸浮培養體系，就包括愈傷組織的誘導、繼代培養、單細胞分離和懸浮培養。目前這項技術已經廣泛應用於細胞的形態、生理、遺傳、凋亡等研究工作，特別是為基因工程在植物細胞水平上的操作提供了理想的材料和途徑。經過轉化的植物細胞再經過誘導分化形成植株，即可獲得攜帶有目標基因的個體。