根據《全國博物館評估辦法（試行）》的規定，經過博物館自評申報，省級文物行政部門評估，全國博物館評估委員會專家核審備案，國家文物局研究決定中國電信博物館等171家為國家二級博物館，按行政區劃排列共171家。
2013年5月21日，經過全國博物館評估委員會的重新定級評估，北京天文館、抗美援朝紀念館、中國海軍博物館和華僑博物院因未達到國家一級博物館標準，被取消國家一級博物館等級，降為國家二級博物館。
2018年5月，北京天文館重評為國家一級博物館。
2018年9月18日，中國博物館協會公布第三批國家二級博物館名單公布顯示，我國國家二級博物館再添97家，總數達286家。
根據國家文物局的規定《博物館評估暫行標準》，博物館評估定級是從博物館綜合管理與基礎設施、藏品管理與科學研究、陳列展覽與社會服務等方面進行評比，將博物館從高到低依次劃分為一級、二級、三級三個等級。
其中二級博物館的標準包括：
◆藏品10000件/套以上，或珍貴文物1000件/套以上；依託各類遺跡遺址、各級文物保護單位或歷史建築建設的考古古建類博物館，可適當放寬至藏品總量達到8000件/套或三級以上珍貴文物800件/套以上
◆具有較高的歷史、文化、科學、藝術價值，或其中一類價值具全國意義
◆有社會教育機構和專門從事社會教育工作的人員，館內設有專門的教育服務區
◆有穩定的、具有一定規模的博物館志願者隊伍，培訓合格的志願者每年應為博物館或觀眾服務4次以上，每名志願者每年為博物館或觀眾服務48小時以上
◆國有博物館每年開放時間應在300天以上
◆基本陳列定期免費開放，且在60天以上
◆日常免費、優惠開放制度和措施向社會公示
◆每年免費接待青少年觀眾人數占觀眾總人數的30%以上；科學管理觀眾容量等。
為全面推進博物館質量控制體系建設，在全面總結國家一級博物館評估定級工作的基礎上，國家文物局於2008年7月23日印發了《關於開展二、三級博物館評估定級工作的通知》，啟動了二、三級博物館的評估工作。
2009年1月，國家文物局研究決定中國電信博物館等171家為首批國家二級博物館，按行政區劃排列共171家。
2013年5月21日，國家文物局公布第二批國家二級博物館名單，同意恭王府博物館等52家博物館為國家二級博物館。
2018年9月18日，第三批國家二級博物館名單公布，中國博物館協會同意
北京汽車博物館等97家博物館為國家二級博物館。
國家二級博物館
中國國家二級博物館列表（截至2018年9月18日）
| 中國電信博物館 | 北京古代建築博物館 | 大鐘寺古鐘博物館 |
| 中國鐵道博物館 | 明十三陵博物館 | 孔廟和國子監博物館 |
| 北京汽車博物館 | 中國園林博物館 | - |
| 河北省科學技術館 | 唐山博物館 | 滄州市博物館 |
| 河北美術館 | 承德避暑山莊博物館 | 山海關長城博物館 |
| 廊坊博物館 | 武強年畫博物館 | 一二九師陳列館 |
| 張家口市博物館 | 李大釗故居紀念館 | 磁縣磁州窯博物館 |
| 石家莊市博物館 | | |
| 大同市博物館 | 祁縣喬家大院民俗博物館 | 紅軍東征紀念館 |
| 中共太原支部舊址 | 河邊民俗博物館 | 榆社縣化石博物館 |
| 晉祠博物館 | 運城博物館 | 呂梁漢畫像石博物館 |
| 山西省民俗博物館 | 晉城博物館 | 長治市博物館 |
| 山西省藝術博物館 | - | - |
| 呼和浩特博物館 | 赤峰市博物館 | 綏遠城將軍衙署 |
| 包頭博物館 | 巴林右旗博物館 | 鄂爾多斯青銅器博物館 |
| 呼倫貝爾民族博物院 | 通遼市博物館 | 阿拉善博物館 |
| 鞍山市博物館 | 張氏帥府博物館 | 旅順日俄監獄舊址博物館 |
| 瀋陽新樂遺址博物館 | 抗美援朝紀念館 | 錦州市博物館 |
| 鞍鋼集團博物館 | - | - |
| 白城市博物館 | 吉林市博物館 | 延邊朝鮮族自治州博物館 |
| 四平戰役紀念館 | - | - |
| 黑龍江省民族博物館 | 哈爾濱建築藝術館 | 齊齊哈爾市博物館 |
| 侵華日軍第七三一部隊罪證陳列館 | 大興安嶺資源館 | 侵華日軍虎頭要塞博物館 |
| 伊春市博物館 | 哈爾濱市阿城金上京歷史博物館 | 佳木斯市博物館 |
| 黑龍江流域博物館 | 北安慶華軍事工業遺址博物館 | |
| 松江區博物館 | 嘉定博物館 | 孫中山故居紀念館 |
| 青浦區博物館 | 宋慶齡故居紀念館 | 上海市歷史博物館 |
| 上海公安博物館 | - | - |
| 新四軍紀念館 | 周恩來紀念館 | 南京地質博物館 |
| 徐州博物館 | 徐州漢兵馬俑博物館 | 徐州漢畫像石藝術館 |
| 鎮江博物館 | 蘇州碑刻博物館 | 連雲港市博物館 |
| 淮安市博物館 | 常熟博物館 | 江陰市博物館 |
| 無錫博物院 | - | - |
| 中國茶葉博物館 | 杭州餘杭區博物館 | 南湖革命紀念館 |
| 麗水市博物館 | 上虞博物館 | 寧波市天一閣博物館 |
| 胡慶余堂中藥博物館 | 湖州市博物館 | 餘姚市河姆渡遺址博物館 |
| 杭州南宋官窯博物館 | 衢州市博物館 | 紹興魯迅紀念館 |
| 永康市博物館 | 嘉興博物館 | 保國寺古建築博物館 |
| 紹興博物館 | 杭州市蕭山區博物館 | 西溪濕地博物館 |
| 餘姚博物館 | 寧波中國港博物館 | 杭州工藝美術博物館 |
| 杭州西湖博物館 | 寧波幫博物館 | |
| 阜陽市博物館 | 新四軍軍部舊址紀念館 | 皖西博物館 |
| 安慶市博物館 | 壽縣博物館 | 淮北市博物館（隋唐大運河博物館） |
| 淮南市博物館 | 歙縣博物館 | 宿州市博物館 |
| 馬鞍山市博物館 | 安徽省地質博物館 | 蚌埠市博物館 |
龍岩市
| 福建省革命歷史紀念館 | 晉江市博物館 | 德化縣陶瓷博物館 |
| 福州市博物館 | 漳州市博物館 | 福州市長樂區博物館 |
| 泉州市博物館 | 華僑博物院 | 上杭縣博物館 |
| 福建省曇石山遺址博物館 | 三明市博物館 | 毛澤東才溪鄉調查紀念館 |
| 廈門市博物館 | 龍岩市博物館 | |
| 景德鎮陶瓷館 | 八大山人紀念館 | 安源路礦工人運動紀念館 |
| 上饒集中營革命烈士紀念館 | 九江市博物館 | 廬山博物館 |
| 宜春市博物館 | 萍鄉博物館 | 婺源博物館 |
| 贛州市博物館 | | |
| 濟南市博物館 | 煙台市博物館 | 張裕酒文化博物館 |
| 孔繁深同志紀念館 | 齊國故城遺址博物館 | 青島啤酒博物館 |
| 青島海產博物館 | 莒縣博物館 | 中國海軍博物館 |
| 臨沂市博物館 | 諸城市博物館 | 泰安市博物館 |
| 淄博市博物館 | 東營市歷史博物館 | 山東大學博物館 |
| 聊城中國運河博物館 | 章丘區博物館 | 威海市文登區博物館 |
| 許昌市博物館 | 洛陽周王城天子駕六博物館 | 鶴壁市博物館 |
| 南陽市博物館 | 虢國博物館 | 洛陽龍門博物館 |
| 洛陽古代藝術館 | 內鄉縣衙博物館 | 新安縣千唐志齋博物館 |
| 新鄭市博物館 | 鄭州二七紀念館 | 鄭州市大河遺址博物館 |
| 三門峽市博物館 | 鞏義市博物館 | 安陽博物館 |
| 洛陽民俗博物館 | 洛陽匾額博物館 | 平頂山博物館 |
| 周口市博物館 | 信陽博物館 | 鄂豫皖革命紀念館 |
| 駐馬店市博物館 | | |
| 武漢革命博物館 | 鄂州市博物館 | 隨州市博物館 |
| 黃岡市博物館 | 宜昌博物館 | 黃石市博物館 |
| 空降兵軍史館 | 恩施土家族苗族自治州博物館 | 十堰市博物館 |
| 襄陽市博物館 | 武當山博物館 | 湖北明清古建築博物館 |
| 長沙市博物館 | 株洲市博物館 | 彭德懷紀念館 |
| 岳陽博物館 | 常德博物館 | 任弼時紀念館 |
| 中國人民抗日戰爭勝利受降紀念館 | 益陽市博物館 | 郴州市博物館 |
| 胡耀邦同志紀念館 | 湘潭市博物館 | 里耶古城（秦簡）博物館 |
| 廣東革命歷史博物館 | 廣東民間工藝博物館 | 廣東海上絲綢之路博物館 |
| 廣州藝術博物院 | 珠海市博物館 | 東莞市博物館 |
| 番禺博物館 | 鴉片戰爭博物館 | 南越王宮博物館 |
| 孫中山大元帥府紀念館 | 毛澤東同志主辦農民運動講習所舊址紀念館 | 江門市博物館 |
| 肇慶市博物館 | 潮州市博物館 | 雲浮市博物館 |
| 惠州市博物館 | 東莞展覽館 | 中山大學生物博物館 |
| 韶關市博物館 | 廣東中醫藥博物館 | 佛山市順德區博物館 |
| 東莞市可園博物館 | 辛亥革命紀念館 | 河源市博物館 |
| 桂林博物館 | 桂海碑林博物館 | 柳州市博物館 |
| 百色起義紀念館 | 南寧市博物館 | 桂林博物館 |
| 梧州市博物館 | 廣西壯族自治區自然博物館 | |
| 成都永陵博物館 | 四川宋瓷博物館 | 宜賓市博物院 |
| 瀘州市博物館 | 三蘇祠博物館 | 新都楊升庵博物館 |
| 朱德同志故居紀念館 | 成都華希昆蟲博物館 | 四川省建川博物館 |
| 貴州省博物館 | 貴州省民族博物館 | 黔東南州博物館 |
| 四渡赤水紀念館 | | |
| 玉溪博物館 | 紅河哈尼族彝族自治州博物館 | 楚雄彝族自治州博物館 |
| 大理白族自治州博物館 | 昆明動物博物館 | 昆明市博物館 |
| 安康博物館 | 咸陽博物館 | 漢中市博物館 |
| 乾陵博物館 | 昭陵博物館 | 茂陵博物館 |
| 法門寺博物館 | 耀州窯博物館 | 西安事變紀念館 |
| 八路軍西安辦事處紀念館 | 陝西自然博物館 | 寶雞市周原博物館 |
| 西北農林科技大學農林博物院 | | |
| 蘭州市博物館 | 平涼市博物館 | 張掖市甘州區博物館 |
| 臨夏州博物館 | 和政古動物化石博物館 | - |
