全稱:Recombinase Polymerase Amplification,重組酶聚合酶擴增。
關鍵酶:能結合單鏈核酸(寡
核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。
酶的最佳反應溫度:37°C左右。
原理:重組酶與
引物結合形成的蛋白-DNA複合物,能在
雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生
鏈交換反應形成並啟動
DNA合成,對模板上的目標區域進行
指數式擴增。被替換的
DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的
擴增產物。