玻璃酸酶

【別名】透明質酸酶，玻璃糖醛酸酶，玻璃樣酸酶。

【作用與用途】由哺乳動物如牛、羊睾丸提取或微生物發酵製得的糖苷內切酶。白色無定形粉末或顆粒，易溶於水，不溶於丙酮、乙醇和乙醚。最適pH值4.0～7.5。液態常溫可穩定24h，5℃以下可穩定一周，100℃加熱30min失活。催化透明質酸等酸性黏多糖水解，產生以丁糖為主的偶寡糖，使透明質酸的黏滯性明顯下降，從而降低組織黏度，提高毛細血管和組織的通透性，加速細胞內外物質的擴散，是一種重要的藥物擴散劑。

為一種能水解透明質酸的酶(透明質酸為組織基質中具有限制水分及其它細胞外物質擴散作用的成分)，用於人體能暫時降低細胞間質的粘性，可促使皮下輸液、局部積貯的滲出液或血液加快擴散而利於吸收，為一種重要的藥物擴散劑。臨床用作藥物滲透劑，促進藥物的吸收，促進手術及創傷后局部水腫或血腫消散。

【劑量與用法】常用量50U～150U溶於生理鹽水，配成每ml含0.7U、1.5U或2.0U的注射液，事先注射於灌注部位。

【副作用】1.禁用於感染局部，以防引起感染擴散。2.應臨時新鮮配製。

方法名稱：

玻璃酸酶的測定—玻璃酸酶測定法

應用範圍：

本方法採用玻璃酸酶測定法測定玻璃酸酶的效價。

本方法適用於玻璃酸酶。

方法原理：

精密稱取本品適量，加冷的水解明膠稀釋劑製成每1mL中約含1.5個單位的溶液，照玻璃酸酶測定法，測定玻璃酸酶的效價。

試劑：

1. 醋酸-醋酸鉀緩衝液

2. 磷酸鹽緩衝液

3.水解明膠

4. 水解明膠稀釋劑

5. 血清貯備液

6. 血清溶液

7. 玻璃酸鉀貯備液

8. 玻璃酸鉀溶液

儀器設備：

可見分光光度計

試樣製備：

1. 醋酸-醋酸鉀緩衝液

取醋酸鉀14g與冰醋酸20.5mL，加水使成1000mL。

2. 磷酸鹽緩衝液

取磷酸二氫鈉2.5g、無水磷酸氫二鈉1.0g與氯化納8.2g，加水使成1000mL。

3.水解明膠

取明膠50g，加水1000mL，在121℃加熱90分鐘，然後冷凍乾燥。

4. 水解明膠稀釋劑

取磷酸鹽緩衝液與水各250mL，加水解明膠330mg搖勻，在0-4℃保存。如溶液不發生混濁，可繼續使用。

5. 血清貯備液

取新鮮牛血清或凍干牛血清（先用水溶解並稀釋至標示量體積）1份，加醋酸-醋酸鉀緩衝液9份稀釋，再以4mol/L鹽酸溶液調節pH值至3.1，放置18-24小時后再用。在0-4℃保存，應可用30日。

6. 血清溶液

血清貯備液中血清總固體（取牛血清適量，置裝有潔凈沙粒並在105℃乾燥至恆重）在8%左右著，取1份，用醋酸-醋酸鉀緩衝液3份；血清總固體在5%左右著，取一份，用醋酸-醋酸鉀緩衝液2份稀釋。臨用時配製。

7. 玻璃酸鉀貯備液

取預先經五氧化二磷減壓乾燥48小時的玻璃酸鉀，加水製成每1mL中含0.5mg的溶液。在0℃以下保存，可應用30日。

8. 玻璃酸鉀溶液

取玻璃酸鉀貯備液一份，用磷酸鹽緩衝液1份稀釋。臨用時配製。

9. 供試品溶液的製備

按估計單位精密稱取本品適量，加冷的水解明膠稀釋製成每1mL中約含1.5個單位的溶液，作為供試品溶液。臨用時配製。

10. 對照品溶液的製備

精密稱取玻璃酸酶對照品適量，加冷的水解明膠稀釋製成每1mL中約含1.5個單位的溶液，作為對照品溶液。臨用時配製。

註：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

1.供試品的測定

取大小相同的試管6支，依次加供試品溶液0.20mL，0.30mL，0.40mL，各2支；再依次相應加入水解明膠稀釋液0.30mL，0.20mL，0.10mL，每隔30秒鐘順序加入玻璃酸鉀溶液0.50mL，使每管的總體積為1.00mL，搖勻，置37℃±0.5℃水浴中；每管準確保溫30分鐘后，每隔30秒順序取出，立即順序加入血清溶液4.0mL，搖勻，在室溫放置 30分鐘，搖勻，在640nm的波長處測定吸光度，同時以磷酸鹽緩衝液0.50mL代替玻璃酸鉀溶液，加水解明膠稀釋液0.50mL，搖勻，按上述方法自“置37℃±0.5℃水浴中”起同法操作，作為空白，計算，即得。