包埋
包埋
包埋是利用包埋劑(可以是有機塑料、金屬等)將需包埋的材料粉末或其他塊體結構包裹起來以提供性能支撐或化學保護的過程。
包埋法是製備固定化酶或固定化細胞的一種方法,是將酶或細胞包埋在能固化的載體中。如將酶包裹在聚丙烯醯胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中,前者包埋成格子型,後者包埋成微膠囊型。包埋法常用於微生物、動物和植物細胞的固定化,凝膠包埋法是應用最廣泛的細胞固定化方法。如何提高包埋效果,哪些技巧又是我們應該掌握的?
有些石蠟特別適合用於滲透,有些更適合用於包埋,而有些都適合(可以向供應商查詢)。
1、石蠟應當在高於其熔點2°C至4°C的溫度下進行熔化和儲存,這樣其中的添加劑才能溶解入液體。如果溫度太低,其中一些較重的添加劑,比如聚合物就會沉在底部,然後最先流出。熔化的石蠟在流出以前最好先進行攪拌。
2、設定包埋機的參數,確保石蠟流出口過夜的時候處於保溫狀態。經常清空並清洗流出口。始終確保流出蠟缸的石蠟是過濾后的。
3、和以往的觀點相反,將石蠟設定在高溫(大約85°C)持續數星期,反而是無害的。儘管石蠟中添加了穩定劑,在氧化作用下,石蠟仍然會變質。最初的徵兆就是顏色轉變為草黃色直到黃色。隨後可能有異味產生。
4、選擇尺寸恰當的模具,確保樣品的四周都被石蠟包圍,樣品置於中心。用壓平裝置或者彎頭鑷子的背部輕柔地將樣品展平(易碎樣品可能會被壓碎)。不要讓樣品在模具中撐太滿。
5、大或硬的樣品必須按照一定角度放置在模具中。如果同一個樣品包含多種不同密度的成分,則包埋的時候要確保樣品最硬的部分必須最後接觸到鋒利的刀刃。皮膚往往帶有毛髮,則包埋的時候必須保證毛髮最後才被切到。
6、動物樣本中,如果組織的來源不同但是切片的性狀相似則可以包埋在同一個蠟塊中,比如肝臟和脾臟,腦組織和脊髓。脫鈣的骨組織必須包埋在“硬”石蠟中,樣品最窄的一端必須位於蠟塊的底邊,從而在切片的時候,最先接觸到刀刃。
7、為了切片的穩定性,模具中必須添加足夠的石蠟,確保包埋盒至少充盈一半。如果石蠟漏出,那麼在蠟塊完全固化之前,必須添加石蠟。