完全培養基

加入生長因子製成的各種營養基

基礎培養基添加血清、抗生素等物質后,叫完全培養基,也叫(血清)細胞培養基。基礎培養基只能維持細胞生存,要想使細胞生長和繁殖,還需添加天然培養基,常用的是牛血清,因為牛血清中含有促細胞增殖的各種生長因子和其他多種有利於細胞生存的物質。此外為防止污染,培養液中尚需加一定量的抗生素。 完全培養基根據添加血清量的多少,可分為細胞生長培養基和細胞維持培養基,用於不同細胞和不同研究。

介紹


完全培養基
完全培養基
完全培養基(Complete medium)這是一種在基本培養基內加入一些富含氨基酸、維生素和鹼基之類的天然物質,即加入生長因子而製成的各種營養基,可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,是微生物學上常用的一種培養基。完全培養基根據添加血清量的多少,可分為細胞生長培養基和細胞維持培養基,用於不同細胞和不同研究。

生長培養基

培養基(液)
培養基(液)
細胞生長培養基(液)是用以維持細胞生長增殖之用,含血清比例較大。生 長培養液是培養細胞工作中最主要的培養用液。其組成為:基礎培養基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青霉素100U/mL和鏈黴素100μg/mL)。
這是適用於一般細胞的培養液組成。為培養特定細胞,還要選擇適應性培養基,可能尚需添加基本培養基中缺少或該細胞需要的成分。

維持培養基

完全培養基
完全培養基
這是為維持細胞緩慢生長或不死的培養液,血清含量甚少。一般細胞因缺少生 長因子不能增殖,生長緩慢;但發生轉化或癌細胞因自身有產生促生長增殖因子的能力,雖在血清缺少情況下仍能生長;因此維持液可用於選擇發生惡性轉化的細胞。其組成為:基本培養基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青霉素100U/mL和鏈黴素100μg/mL)。
此處需注意,如培養正常細胞完全不加血清,可維持細胞不死,但時間過長細胞難免退化。

方法


把誘變處理后的細胞接種在含有微量(<0.01%)蛋白腖的基本培養基平板上,野生型細胞就迅速長成較大的菌落,而營養缺陷型則緩慢生長成小菌落。若需獲得某一特定營養缺陷型,可再在基本培養基中加入微量的相應物質。
在基本培養基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營養缺陷型能在基本培養基中生長而被保留下來。
當需要對細菌進行分離培養時,會用到完全培養基。完全培養基,由於其營養成分較全面,因此被培養的微生物生長較快。