免疫法

抗原與抗體結合生成的分析法

免疫法是基於抗原與抗體結合生成沉澱所建立的分析法。常用的免疫學方法有放射免疫測定法(RIA)酶聯免疫吸附測定。由於其技術成熟及靈敏度高,目前仍在使用,但已逐漸被ELISA 所取代。與RIA 相比較,ELISA 的優點是試劑壽命長、重複性好、自動化程度高、無放射性危害等,而且在有的實驗研究中它與生物檢定法有相似的量效曲線,說明它能部分地反映生物活性,現在被廣泛地用於一些蛋白質方面的研究。

方法簡介


反射免疫法:首先將純凈抗原注射給動物,獲得對此抗原的特異性抗體。進行測定時,先將激素同位素標記。標記的激素和未標記的待測激素對抗體有競爭作用,如果標記的激素和抗體的量保持恆定,加入未標記的待測激素后,標記的激素和抗體的結合會減少。加入未標記的待測激素量愈多,則標記的激素與抗體結合的量愈少。這樣結合的標記激素(B)與未結合的標記激素(F)的比值與待測的未標記激素的量呈反比關係。根據這種關係,可以用一系列已知濃度的激素畫出標準曲線,利用此標準曲線,只要測得標本B/F的值,便能查出該激素在血漿中的濃度。