免疫比濁法

免疫比濁法（ Turbidimetric inhibition immuno assay）是抗原抗體結合動態測定方法。其基本原理是：當抗原與抗體在特殊稀釋系統中反應而且比例合適(一般規定抗體過量)時，形成的可溶性免疫複合物在稀釋系統中的促聚劑（聚乙二醇等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反應液出現濁度。當抗體濃度固定時，形成的免疫複合物的量隨著檢樣中抗原量的增加而增加，反應液的濁度也隨之增加。通過測定反應液的濁度與一系列標準品對照，即可計算出檢樣中抗原的含量。

抗體（Ab）與可溶性抗原（Ag）反應，形成一定結構的免疫複合物，成為懸浮於反應溶液中的微粒。在沉澱反應中形成的複合物微粒具有特殊的光學性質，可用儀器檢測，提高了檢測的速度、靈敏度和易操作性。

免疫比濁測定注意事項：

1、抗原或抗體量大大過剩，可出現可溶性複合物，造成誤差。

2、應維持反應管中抗體蛋白始終過剩。

3、易受到脂血的影響。

1.免疫透射比濁法 抗原抗體結合后，形成免疫複合物，在一定時間內複合物聚合出現濁度。當光線通過溶液時，可被免疫複合物吸收。免疫複合物量越多，光線吸收越多。光線被吸收的量在一定範圍內與免疫複合物的量成正比。利用比濁計測定光密度值，複合物的含量與光密度值成正比，同樣當抗體量一定時，光密度值也與抗原含量成正比。本法較單向瓊脂擴散試驗和火箭電泳等一般免疫化學定量方法敏感、快速簡便，但要求免疫複合物的數量和分子量達到一定高度，否則就難以測出。

2.免疫散射比濁法 一定波長的光沿水平軸照射，通過溶液使遇到抗原抗體複合物粒子，光線被粒子顆粒折射，發生偏轉，光線偏轉的角度與發射光的波長和抗原抗體複合物顆粒大小和多少密切相關。散射光的強度與複合物的含量成正比，即待測抗原越多，形成的複合物也越多，散射光也越強。散射光的強度還與各種物理因素，如加入抗原或抗體的時間、光源的強弱和波長、測量角度等密切相關。散射比濁法又分為速率散射比濁法和終點散射比濁法。

3.免疫膠乳比濁法 膠乳比濁法即是將待測物質相對應的抗體包被在直徑為15－60nm的膠乳顆粒上，使抗原抗體結合物的體積增大，光通過之後，透射光和散射光的強度變化更為顯著，從而提高試驗的敏感性。

直徑為15－60nm的膠乳顆粒常見：聚苯乙烯。

早期免疫分析通過觀察沉澱物形成，凝集及溶血現象發生來分析，如免疫擴散、免疫電泳、血凝試驗、補體結合等。

上世紀50年代末60年代初，利用AG-AB複合物形成使濁度改變，再用比濁計來比濁，但因其敏感性差未被接受。

70年代初，開始有自動檢測系統，但因其用的是激光為光源，固定波長，靈敏度較低，而且時間一般要2—3小時，很難滿足臨床需要。

70年代末，速率比濁計的出現，使抗原抗體結合的反應在幾十秒內出結果，可以說是免疫化學測定的革命性的發展。

隨著標記技術的發展，免疫化學納入臨床化學檢驗範疇。