TE緩衝液

TE緩衝溶液（Tris-EDTA buffer solution）

在生化研究工作中，常常要用到緩衝溶液來維持實驗體系的酸鹼度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效。如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大，會使酶活性下降甚至完全失活。所以我們要學會配製緩衝溶液。

由弱酸及其鹽組合一起使具有緩衝作用。生化實驗室常常用的緩衝系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統，在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩衝體系，因為有時影響實驗結果的因素並不是緩衝液的pH值，而是緩衝液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩衝劑都可能產生不需要的反應。

硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。

檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。

磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉澱出來。而且它在pH7.5以上時緩衝能力很小。

三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用，但在有些系統中也起抑止的作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris一緩衝液，在4℃時是8.4，在37℃時是7.4，因此，4℃配製的緩衝液拿到37℃測量時，其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，緩衝能力差。

1×TE Buffer

組成濃度：10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0

配製量：500ml

配製方法：量取下列溶液於500ml燒杯中

1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml

0.5M EDTA PH=8.0 1ml

向燒杯中加入約400mldd HO均勻混合；將溶液定容到500ml后，高溫高壓滅菌；室溫保存.

TE緩衝液是弱鹼性，對DNA的鹼基有保護性,(DNA在TE中的穩定性較好，不易被破壞其完整性或產生開環及斷裂),包括提取好的DNA也要放在TE緩衝液中保存.

TE緩衝液是Tris +EDTA緩衝液，這種緩衝液我們一般用作溶解劑或保持劑，主要是調控PH，TAE是一種電泳緩衝液，主要用於DNA分子的電泳。 TE組成濃度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配製量：500ml 配製方法：量取下列溶液於500ml燒杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向燒杯中加入約400mldd H2O均勻混合；將溶液定容到500ml后，高溫高壓滅菌；室溫保存.

TAE是使用最廣泛的緩衝系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量（TBE中電泳時測出的相對分子質量會大於實際分子質量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩衝液快約10%，電泳大於13kb的片段時用TAE緩衝液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩衝系統進行電泳。TAE的缺點是緩衝容量小，長時間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環裝置使兩極的緩衝液得到交換。 50×TAE Buffer 配製方法： 1. 稱量Tris 242g，Na2EDTA.2H2O 37.2g 於1L燒杯中； 2.向燒杯中加入約800ml去離子水，充分攪拌均勻； 3加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解； 4.加去離子水定容至1L后，室溫保存。