急性毒性試驗

急性毒性試驗主要測定半數致死量（濃度），觀察急性中毒表現，經皮膚吸收能力以及對皮膚、粘膜和眼有無局部刺激作用等，以提供受試物質的急性毒性資料，確定毒作用方式、中毒反應，並為亞急性和慢性毒性試驗的觀察指標及劑量分組提供參考。

一、概念和試驗目的

(一) 急性毒性概念

急性毒性是指機體(人或實驗動物)一次(或24小時內多次)接觸外來化合物之後所引起的中毒效應，甚至引起死亡。

但須指出化合物使實驗動物發生中毒效應的快慢和劇烈的程度，可因所接觸的化合物的質與量不同而異。有的化合物在實驗動物接觸致死劑量的幾分鐘之內，就可發生中毒癥狀，甚至死亡。而有的化合物則在幾天後才顯現中毒癥狀和死亡，即遲發死亡。此外，實驗動物接觸化合物的方式或途徑不同，“一次”的含義也有所不同。凡經口接觸和各種方式的注射接觸，“一次”是指在瞬間將受試化合物輸入實驗動物的體內。而經呼吸道吸入與經皮膚接觸，“一次”是指在一個特定的期間內實驗動物持續地接觸受試化合物的過程，所以“一次”含有時間因素。

(二) 實驗目的

1.求出受試化合物對一種或幾種實驗動物的致死劑量(通常以LD50為主要參數)，以初步估計該化合物對人類毒害的危險性。

2.闡明受試化合物急性毒性的劑量－反應關係與中毒特徵。

3.利用急性毒性試驗方法研究化合物在機體內的生物轉運和生物轉化過程及其動力學變化。也可用於研究急救治療措施。

二、實驗動物和染毒方法

(一) 實驗動物選擇

在衛生毒理學領域中，體內試驗以實驗動物為研究對象，最終是為了闡明受試外來化合物對人的急性危害性質和危害強度。所以選擇實驗動物時，要求在其接觸化合物之後的毒性反應，應當與人接觸該化合物的毒性反應基本一致，雖然利用任何一種或幾種實驗動物的急性毒性結果向人外推都必須十分慎重，但這一選擇實驗動物的原則仍非常重要。

1.物種選擇以選擇哺乳動物為主。目前實際應用中以大鼠和小鼠為主，尤以大鼠使用很多。需指出大鼠並非對外來化合物都最敏丅感。家兔常用於研究化合物的皮膚毒性，包括對粘膜的刺激。貓、狗也用於急性毒性試驗，但因價貴不易於大量使用。豬為雜食動物，對一些化合物的生物效應表現與人有相似之處，尤其是皮膚結構與人較近似。但因體大、價貴，不便大量使用。

歸納起來，在進行化合物急性毒性研究中，選擇實驗動物的原則是：盡量選擇對化合物毒性反應與人近似的動物；易於飼養管理，試驗操作方便；易於獲得、品系純化，且價格較低的動物。為了有利於預測化合物對人的危害，要求選擇兩種以上的實驗動物，最好一種為嚙齒類，一種為非嚙齒類，分別求出其急性毒性參數。

一般研究外來化合物急性毒性，需雌雄兩性動物同時分別進行，每個劑量組兩性動物數相等。急性毒性使用小鼠體重以18~25g、大鼠180~240g、豚鼠200~250g、家兔2~2.5kg、貓1.5~2.0kg左右為宜。

(二) 實驗動物餵養環境

實驗動物餵養室室溫應控制在22±3℃，家兔可控制在20±3℃，相對濕度30%～73%，無對流風。每籠動物數以不干擾動物個體活動及不影響試驗觀察為度，必要時需單籠飼養。飼養室採用人工晝夜為好，早6點至晚6點進行12小時光照，其餘12小時黑暗，一般食用常規試驗室飼料，自由飲水。

(三) 實驗動物染毒方法

1.經口(胃腸道)接觸目的是研究外來化合物能否經胃腸道吸收及求出經口接觸的致死劑量(LD50)等。由於外來化合物可以污染飲水及食物，因此，此種染毒方式在衛生毒理學中佔有重要地位。

(1) 灌胃是將液態受試化合物或固態、氣態化合物溶於某種溶劑中，配製成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經過導管注入胃內。

在每一試驗系列中，同物種實驗動物灌胃體積最好一致，即以單位體重計算所給予的毫升數應一致，即ml/kg或ml/g計。這是因為成年實驗動物的胃容量與體重之間有一定的比例。按單位體重計算灌胃液的體積，受試化合物的吸收速度相對較為穩定。小鼠一次灌胃體積在0.2~1.0ml/只或0.1~0.5ml/10g體重較合適，大鼠一次灌胃體積不超過5ml/只(通常用0.5~1.0ml/100g體重)，家兔不超過10ml/2kg體重，狗不超過50ml/10kg體重。