親和沉澱

親和沉澱

親和沉澱被認為是分離純化酶及蛋白質的強有力的技術手段,這種方法可以較經濟有效地使用配基,能夠大規模、快速、特異性地分離純化酶及蛋白質。

實質


親和沉澱實質是配體-產品複合物的沉澱。在親和沉澱的研究中,現在主要是採用親和配體-溶解可逆聚合物作為蛋白質的親和沉澱劑。親和沉澱被認為是分離純化酶及蛋白質的強有力的技術手段,這種方法可以較經濟有效地使用配基,能夠大規模、快速、特異性地分離純化酶及蛋白質。

原理


親和沉澱採用物理場(如pH、離子強度和溫度等)改變時發生可逆性沉澱的水溶性聚合物為親和配體的載體,從而
利用目標分子與其親和配體的特異性結合作用及沉澱分離的原理進行目標分子的分離純化,是蛋白質等生物大分子的新型親和分離技術之一。

方便


由於生物親和相互作用的選擇性高,離心分離法操作簡便、易於放大,因此親和沉澱法不僅具有接近於親和層析法的純化效率,而且可彌補親和層析法放大困難的缺點。此外,親和沉澱操作中目標分子與配體的親和相互作用在水溶狀態下進行,傳質阻力小、吸附速率快、可處理高黏度甚至含微粒的粗原料。因此,親和沉澱法可在分離過程的初期採用,有利於減少分離步驟、提高產率降低成本

實用價值


迄今為止,親和沉澱還沒有在工業生產中運用的主要原因是缺乏適當的大規模親和沉澱溶解可逆高聚物。本平台成功合成出蛋白質分離用聚合物,包括光敏感溶解可逆親和沉澱高聚物和熱敏感溶解可逆親和沉澱高聚物,已經具有了大規模應用的實際價值。

參考資料


http://www.purify.org.cn/web/flchjsfw.asp
http://www.purify.org.cn/web/flchjsfw.asp?ArticleID=18