分生組織培養
分生組織培養
分生組織培養是將變異植株的枝條頂端切下,用自來水反覆沖洗乾淨后,再用75%酒精漂洗,然後,轉入2%次氯酸鈉中浸泡15~30min,取出用蒸餾水沖洗3次,置無菌濾紙上吸干,在超凈工作台上,用滅過菌的解剖刀和解剖針,將生長點剝出,切成幾微米至幾毫米的小塊,接種到有瓊脂培養基(如MS培養基)的玻璃瓶中,封口後放在培養室培養。培養室光照強度通常保持1500~5000Lx,溫度為25~27℃。當形成愈傷組織后,應及時轉到新的培養基上,進行繼代培養。當分化成小植株並長到一定大小時,將其取出,洗掉根上的培養基,移栽到以珍珠岩等為基質的載植盤中,經受自然條件鍛煉一定時間后,再定植於露地。由於分生組織在培養過程中還會產生變異,需要進行單株分離,穩定后,才能視作新的種質資源。
分生組織是植物體內由一些具備持續分裂能力的細胞組成的細胞群。分生組織的細胞代謝旺盛,具有很強的分裂能力;排列緊密,無細胞間隙;細胞壁薄,細胞核大。分生組織主要存在於植物的生長部位,由於分生組織的存在,植物才能始終保持生長的能力或潛能,植物體才能得以終生不斷地伸長或增粗。分生組織按其在植物體中所處的位置不同,分為頂端分生組織、側生分生組織和居間分生組織。頂端分生組織位於根、莖及分枝的頂端,細胞分裂和生長使根、莖不斷伸長,形成側枝、葉、側根和生殖器官。側生分生組織存在於植物根和莖的內側,植物構造上稱形成層。居間分生組織是頂端分生組織在某些器官中局部區域的保留,存在於植物莖的節間基部和葉片基部,禾本科植物的拔節、抽穗都是居間分生組織的活動的結果。
養篩選出最佳培養基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1~0.2mg/L+3%蔗糖+瓊脂6.0g/L;最適宜培養溫度為26~30℃;癥狀學診斷法、指示植物鑒定法進行病毒檢測,平均脫毒率達83.7%.脫毒試管苗切段快速增殖,繁殖係數為5n,繁殖速度以幾何級數增長,一定時間內可大量繁殖脫毒苗。脫毒苗移栽大田進行產量比較,平均增產率達37.8%.