細胞毒性T淋巴細胞

殺傷機制：1.釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細胞。

2.通過Fasl介導靶細胞的凋亡。

作用特點：

1.可連續殺傷靶細胞，具有高效性

2.具有抗原特異性

3.具有自身MHC限制性

細胞毒性T淋巴細胞的檢測技術有四聚體技術，ELISPOT，Cr51釋放等。

Coal-to-liquids（CTL），煤制油，由煤炭氣化生產合成氣、再經費-托合成生產合成油稱之為煤炭間接液化技術。

CTL是以克隆為單位的不均質的細胞群，根據其細胞表面標誌（表面抗原和表面受體）可分為3類：

1、細胞毒或殺傷性T細胞（Tc）：其表面抗原為CD3，CD4，CD8，TCR有a和β兩條多肽鏈組成。

2、細胞毒性T輔助細胞（CTh）：其細胞表面標誌為CD3，CD4，CD8，TCRaβ，它是原來的T輔助細胞，近來發現其在有些情況也表現細胞毒效應的功能，故新命名細胞毒性T輔助細胞。它主要通過識別特異性抗原和I類MHC分子的腫瘤細胞，並殺傷這些腫瘤細胞，在防止一些淋巴系統的腫瘤及殺傷某些抗原調變的腫瘤細胞變異株可能有一定的意義。

3、新一類的殺傷性T細胞：它的細胞表面標誌為CD3，CD4，CD8，TCRn或CD3，CD4，CD8，TCRn細胞，是近年來發現的一種新的殺傷性T細胞。其特點是具有了γ和β鏈組成T細胞抗原變體，而且所介導的殺傷細胞效應是MHC非限制性的。

一、殺傷靶細胞的過程

CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下：

1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可促使TCR識別抗原分子，一旦識別抗原CD3分子傳導信號，可通過β鏈磷酸化從而導致LFA-1的激活，被激活的LFA-1介導CTL與靶細胞結合。

2、第二信使的激活與信息傳導：CTL與靶細胞結合的信息可導致CTL膜中與鳥嘌呤核苷結合蛋白相關的磷脂酶C的活化，此酶水解膜組分PIP2（磷脂醯肌醇二磷酸），所得產物IP3（肌醇三磷酸）與DG（二酯醯甘油）都可被看作第二信使，IP3與DG又激發兩個互相聯繫又互相獨立的分子反應，

細胞毒性T淋巴細胞（紅）攻擊癌細胞

3、Ca離子釋放與蛋白激酶的活化：IP3能使Ca儲存網迅速釋放Ca造成胞液中Ca上升，遊離Ca能活化鈣調素依賴性蛋白激酶使蛋白磷酸化，後者可激發核內DNA複製；DG與遊離Ca反應激活胞漿中的重要介質PKC（蛋白激酶C），PKC使胞漿內顆粒中的蛋白質分子磷酸化，使膜上的LFA-1的β鏈磷酸化，磷酸化的LFA-1又與細胞骨架相互作用從而引導細胞顆粒遷移到與靶細胞相結合的部位，釋放各種溶細胞介質，從而促使靶細胞溶解和死亡。

細胞毒性T淋巴細胞（下）攻擊癌細胞

二、靶細胞的溶解與死亡原因

主要是靶細胞膜損傷后所致的細胞破裂和DNA斷裂引起的核崩解促使靶細胞死亡，至此過程CTL可產生多種細胞毒介質殺傷祝細胞，這些介質包括：穿孔素、絲氨酸酯醇、干擾素和腫瘤壞死因子，這4種介質中，穿孔素的殺傷機制是當殺傷細胞粘著在配細胞膜上，前者胞質含有的穿孔素顆粒在高濃度Ca存在下被降解，釋放穿孔素單位進入細胞間隙，通過聚合作用在靶細胞膜上形成跨膜通道，導致膠體滲透破壞細胞，但一般認為，在人體中不依賴Ca的非穿孔素殺傷及旁殺傷作用（如腫瘤壞死因子樣殺傷等）可能是機體殺傷靶細胞的基本途徑。而IL-2誘導的依賴Ca的穿孔素樣殺傷作用則可能是應激狀態下的輔助途徑。

該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8T淋巴細胞的裂解或者引起的炎症反應。用細胞毒性T淋巴細胞（CTL）測試細胞介導免疫需要成功的抗原呈遞，以及隨之產生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉導來產生記憶T淋巴細胞，這是T細胞應答的基礎。CTL試驗曾用於小鼠和大鼠，也用於大型動物模型，但標準的臨床前評價試驗模型還沒有建立。

較好的用於CTL試驗的抗原是活的流感病毒。將選擇的病毒通過鼻內感染的方式感染成年動物。用已知數目的病毒隔夜培養MCH1靶細胞，或者在用Cr標記前的預定時間培養。在感染以及病毒複製之後（通常數日至1周），收集脾、肺、淋巴結和骨髓，製備單細胞懸液。將來自淋巴組織的效應細胞與同一配比或不同配比的MHC1靶細胞共培養，計數每一配比中自溶細胞的比例，與對照組進行比較。

分析方法為比較試驗組和對照組的自溶指數。自溶指數減少提示免疫抑制。