吸光光度法

吸光光度法

吸光光度法是對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法。

方法原理


吸光光度法是藉助分光光度計測定溶液的吸光度,根據朗伯一比耳定律確定物質溶液的濃度。吸光光度法是比較有色溶液對某一波長光的吸收情況。

特點


A靈敏度高
一般吸光光度法所測定的下限可達10-5~10-6mol/L,因而有較高的靈敏度,適用於微量組分的分析。
B準確度較高
吸光光度法的相對誤差為2%~5%,採用精密的分光光度計測量,相對誤差為1%~2%,其準確度雖不如滴定分析法高,但已滿足微量組分測定的準確度要求,而對微量組分的測定,滴定分析法是難以進行的。
C簡便、快速
吸光光度法所使用的儀器——分光光度計,操作簡單,易於掌握。近年來,由於一些靈敏度高、選擇性好的顯色劑和各種掩飾不斷出現,常可不經分離直接進行吸光度分析,有效地簡化了測量步驟,提高了分析速度。
D應用廣泛
幾乎所有的無機物和許多有機化合物都可直接或間接地用吸光光度法進行測定。從外,該法還可用來研究化學反應的機理,以及溶液的化學平衡等理論。如測定配合物的組成,弱酸弱鹼的理解常數等。由於有機試劑和配位化學的迅速發展及分光光度計性能的提高。吸光光度法已廣泛用於生產和科研部門。

測定方法


1、單一組分的測定
①比較法。比較法是先配製與被測試液濃度相近的標準溶液c(S)、被測試液c(X),在相同條件下顯色、定容后,測其相應的吸光度為A和A(X),根據朗伯一比耳定律:
A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)
由於同一物質,用同一波長及相同厚度的吸收皿測定
ε(X)=ε(S) b(X)=b(S)
所以 A(S):A(X)=c(S):c(X)
即可求出待測試液的含量c(X)。
A
應當注意,進行計算時,只有當與相近時,結果才可靠,否則將有較大誤差
吸光光度法的特點是:因入射光是純度較高的單色光,故使偏離朗伯一比耳定律的情況大為減少,標準曲線直線部分的範圍更大,分析結果的準確度較高。因可任意選取某種波長的單色光,故利用吸光度的加和性,可同時測定溶液中兩種或兩種以上的組分。由於入射光的波長範圍擴大了,許多無色物質,只要它們在紫外或紅外光區域內有吸收峰,都可以用吸光光度法進行測定。
2、高含量組分的測定——示差法
3、多組分的分析