amv

一種逆轉錄酶

簡介


AMV逆轉錄酶
AMV逆轉錄酶
AMV是一種逆轉錄酶的名稱。amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化,完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用於cdna合成,也可用於rnadna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板,具有以rna為模板的dna聚合酶活性,dna為模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性,最適反應溫度在42-55℃,最高可達60℃,如果使用焦磷酸鈉,最適溫度為37-41℃。rtt反應緩衝液根據不同用途可以作為5x或10x反應液使用,同時可抑制rnaseh酶活性。按照標準使用方法可以得到長至10-12kbcdna。rt007amv逆轉錄酶比普通amv逆轉錄酶和mmlv逆轉錄酶能耐受更高的溫度和合成更長的cdna。

基本資料


反應溫度:42-60℃產物長度:10-12kb
來源:禽畜源,全酶
反應效率:5u/reaction
rnaseh活性:弱,被抑制

特點


1.高靈敏度2、高得率
3.高達60℃的反應溫度可有效打開rna二級結構
4.可合成長至10-12kb的cdna
5.rt反應液可適用不同用途

應用


1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃經amv酶逆轉錄後進行pcr的產物電泳結果2、1μg helatotalrna經amv酶逆轉錄后擴增不同長度pcr產物的電泳結果,amv酶可以轉錄長至9.6kb的mrna
3.1μg helatotalrna經以下各種逆轉錄酶逆轉錄后(按照各自protocol)進行pcr的產物電泳結果
4.1μg helatotalrna經以下各種逆轉錄酶逆轉錄后(按照各自protocol)進行熒光pcr(sybrgreeni)的結果。