全自動氨基酸分析儀

全自動氨基酸分析儀

全自動氨基酸分析儀是一部科學儀器,用於測試各種氨基酸

指標信息


指標信息:解析度:THR-Ser Ile-leu ≥98%保留時間重現性:RSD≤0.5%(水解,所有峰)峰面積重現性:RSD≤1%(水解,所有峰)

工作原理


測定原理是利用樣品各種氨基酸組分的結構不同、酸鹼性、極性及分子大小不同,在陽離子交換柱上將它們分離,採用不同pH值離子濃度的緩衝液將各氨基酸組分依次洗脫下來,再逐個以另一流路的茚酮試劑混合,然後共同流至螺旋反應管中,於一定溫度下(通常為115~120℃)進行顯色反應,形成在570nm有最大吸收的藍紫色產物。其中的羥脯氨酸與茚三酮反應生成黃色產物,其最大吸收在440nm。這些有色產物對570nm、440nm光的吸收強度與洗脫出來的各氨基酸的濃度(或含量)之間的關係符合比耳定律,可與標準氨基酸比較作定性和定量測定。

樣品處理

測定樣品中各種遊離氨基酸含量,可以除去脂肪雜質后,直接上柱進行分析。
測定蛋白質的氨基酸組成時樣品必須經酸水解,使蛋白質完全變成氨基酸后才上柱進行分析。

樣品分析

經過處理后的樣品上柱進行分析。上柱的樣品量根據所用自動分析儀的靈敏度來確定。一般為每種氨基酸0.1μmol 左右(水解樣品乾重為0.3mg左右)。測定必須在pH5~5.5、100℃下進行,反應進行時間為10~15min,生成的紫色物質在570nm波長下進行比色測定。而生成的黃色化合物在440nm波長下進行比色測定。做一個氨基酸全分析一般只需1h左右,同時可將幾十個樣品一起裝入儀器,自動按序分析,最後自動計算給出精確的數據。儀器精確度在±1~3%。用陽離子交換柱分離及測定氨基酸所的如下圖

結果計算


帶有數據處理機的儀器,各種氨基酸的定量結果能自動列印出來,否則,可用尺子測量峰高或用峰高乘以半峰寬確定峰面積進而計算出氨基酸的精確含量。另外,根據峰出現的時間可以確定氨基酸的種類。

說明概要


①顯色反應用的茚三酮試劑,隨著時間推移發色率會降低,故在較長時間測樣過程中應隨時採用已知濃度的氨基酸標準溶液上柱測定以檢驗其變化情況。
②近年出現的採用反相色譜原理製造的氨基酸分析儀,可使蛋白質水解出的17種氨基酸在12min 內完成分離,且具有靈敏度高(最小檢出量可達1pmol)、重現性好以及一機多用等優點。

應用舉例


(一)醫學上的應用
■氨基酸代謝異常角度闡述了氨基酸與肝性腦病的關係
■血清中11種遊離氨基酸的降低可直接影響人體組織的正常發育、生長
■必需氨基酸在創傷癒合中的關係
■腫瘤組織氨基酸代謝的變化規律
(二)飼料上的應用
■質量控制
各種飼料必需氨基酸的含量和它們之間的比例必須恰當,測定原料和產品中的氨基酸含量,以達到保證質量的目的。
■真偽鑒別
魚粉氨基酸組成特點是賴氨酸、蛋氨酸含量高,氨基酸分析結果很容易就可以辨別真偽。
(三)農業、食品、飲料及其它
■對玉米、大豆、小麥等農作物的氨基酸含量進行檢測
■對果汁、飲料進行真偽的鑒別
■檢驗測定茶氨酸來鑒別真偽茶葉
■對醬油級別的認定

儀器推薦


代錶廠家:德國曼默博爾A300、德國sykam、日本hitachi