預試驗
預試驗
預試驗指在進行未知物檢測時,通過直接觀察檢材的外觀、氣味等性狀,或者進行些如pH值檢測、變色反應等簡單的化學反應,或者進行動物毒性試驗等,初步探索檢驗方向,為檢驗方案的設計提供依據的過程。預試驗多用於體外檢材,較少用於體內檢材物。如果檢測目標明確,則無需進行預試驗。
目錄
預試驗是一種試探性的檢驗方法,確定血液是否存在,通過預試驗可從大量檢材中篩選出需要進一步檢驗的斑痕。預試驗的常用方法有聯苯胺試驗、酚酞試驗、化學發光試驗和紫外線濃硫酸試驗等。
1.聯苯胺試驗
血痕中的血紅蛋白的過氧化酶活性作用,使過氧化氫放出新生態氧,將無色聯苯胺氧化成翠藍色的聯苯胺藍,靈敏度很高,血液稀釋到20—30萬倍,仍呈陽性反應。但是聯苯胺不是血液特異性反應,由於自然界中很多物質含過氧化酶,也能引起陽性反應。
試驗時,剪取或刮取檢材少許,置濾紙片上或白磁板上,加聯苯胺無水酒精飽和液、冰醋酸、過氧化氫各一滴,如系血痕,則立即出現翠藍色為陽性反應。斑痕難以取下時,可用蒸餾水浸濕濾紙擦拭斑痕,使斑痕上的物質移行到濾紙上,然後以同樣的方法進行試驗。
2.酚酞試驗
利用血紅蛋白或正鐵血紅素的過氧化酶活性,使過氧化氫分解出新生態氧,將還原酚酞氧化成酚酞,酚酞在鹼性溶液中呈粉紅色。本法的靈敏度極高,可達10—50萬倍,但非特異性,氧化劑(如銅、鐵、鎳)及膿液、精液、尿液、新鮮植物汁等均呈陽性反應。
試驗時,將可疑血痕的生理鹽水浸液1—2毫升置試管中煮沸半分鐘,破壞可能存在的生物氧化酶;冷后,加5滴還原酚酞液,半分鐘后,如不變紅色,再加數滴3%過氧化氫,則立即出現程度不同的粉紅色至紅色為陽性反應。
3.化學發光試驗
由於血紅蛋白的過氧化酶作用使魯米諾產生化學發光,適用於夜間或黑暗地方尋找血跡。用肉眼難以發現的物體上的微量血痕,採用此試驗有助於檢查。本試驗很靈敏,對粘液、唾液、尿液、糞便等都不起發光反應。試驗時,應同時用已知血痕作對照。
操作方法是:將新配製的試劑(魯米諾0.1克,過氧化鈉0.5克,蒸餾水100毫升),置於噴霧器內,在暗室內對可疑斑痕進行噴灑,如系血痕立即呈現青白色的發光現象。
4.紫外線濃硫酸試驗
取可疑斑痕少許,放白磁板上,加濃硫酸一滴,置於紫外線下觀察,如系血痕則呈橙黃色熒光,如加氫氧化銨則呈淡紅色熒光。
本試驗靈敏度較差,但具有較好的特異性,除對血液、人體及動物部分臟器可呈陽性反應外,對唾液、精斑及其他分泌物均呈陽性反應。