核苷磷酸化酶

核苷磷酸化酶

核苷磷酸化酶（nuclosidephosphoryalse）：能分解核苷生成含氮鹼和戊糖的磷酸酯的酶。

嘌呤核苷磷酸化酶(英文名稱：Purinenucleosidephosphorylase，或簡寫為PNPase)是參與嘌呤代謝的一種酶。嘌呤核苷磷酸化酶可以代謝腺苷到腺嘌呤，肌苷到次黃嘌呤，鳥苷到鳥嘌呤，並在這些反應中產生核糖-5-磷酸。

需要注意的是，PNPase這一簡稱還被用於另一個不相關的酶，多核苷酸磷酸化酶（PolynucleotidePhosphorylase）。

嘌呤核苷磷酸化酶缺陷型病患會有免疫缺陷，而只有免疫系統中的T細胞和B細胞不受此缺陷影響。

以次黃苷+磷酸次黃嘌呤+核糖-1-磷酸的方式，參與將核苷加磷酸分解成五碳糖磷酸反應的酶之總稱。已知有幾種對底物的特異性不同，如嘌呤核苷磷酸化酶（EC2．4．2．1）對鳥苷、脫氧鳥苷、次黃苷、脫氧次黃苷具有作用，它存在於脾、肺、肝、心肌、紅血球、酵母中，小腸和血液中也有少量存在。另外已知嘧啶核苷磷酸化酶是對尿苷和胸腺苷分別具有特異性的酶。推測主要是分解核苷或具有供給合成其它核苷所需的核糖磷酸的作用。

核苷磷酸化酶通式(I)的化合物，它們是嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、嘌呤磷酸核糖轉移酶(PPRT)、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)、5’-甲硫基腺苷核苷酶(MTAN)和/或核苷水解酶(NH)的抑製劑。本發明還涉及這些化合物在治療包括癌症、細菌感染、原生動物感染、T-細胞介導的疾病在內的疾病和感染中的應用，並涉及含有這些化合物的藥物組合物。

通過雙酶切方法將重組質粒上大腸桿菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因克隆到pBV220表達載體上，構建了溫敏型PNPase的表達載體pBV220-PNP，轉化大腸桿菌DH5α並使之表選。SDS-PAGE電泳結果顯示出明顯的特異表達條帶，其分子量約為26kDa。在此基礎上研究了不同誘導條件對蛋白表達量的影響分別以肌苷和尿苷為核糖供體研究重組菌轉化腺苷的條件，發現肌苷最適合作為核糖供體，在30mmol•L^(-1)pH7.5的Na2HPO4-KH2PO4緩衝液中，以30mmol•L肌苷和10mmol•L^(-1)腺漂呤作底物，加入0.5%基因工程濕菌體60℃反應3h，腺苷的轉化率為85.57%。