糖基化

糖基化

糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,起始於內質網,結束於高爾基體。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。

過程


N-連接的糖鏈合成起始於內質網,完成於高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的 糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種 糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖蛋白的空間結構決定了它可以和哪一種 糖基轉移酶結合,發生特定的糖基化修飾。
許多糖蛋白同時具有N-連接的糖鏈和O-連接的糖鏈。O-連接的糖基化在高爾基體中進行,通常的一個連接上去的糖單元是N-乙醯半乳糖,連接的部位為Ser、Thr和Hyp的羥基,然後逐次將糖基轉移到上去形成寡糖鏈,糖的供體同樣為核苷糖,如UDP-半乳糖。糖基化的結果使不同的蛋白質打上不同的標記,改變多肽的構象和增加蛋白質的穩定性。
在高爾基體上還可以將一至多個氨基聚糖鏈通過木糖安裝在核心蛋白的絲氨酸殘基上,形成蛋白聚糖。這類蛋白有些被分泌到細胞外形成細胞外基質或粘液層,有些錨定在膜上。

分類


根據 糖苷鏈類型,蛋白質糖基化可以分為四類,即以絲氨酸、蘇氨酸、羥賴氨酸和羥脯氨酸的羥基為連接點,形成-0-糖苷鍵型。以天冬醯胺的醯胺基、N一末端氨基酸的 α - 氨基以及賴氨酸精氨酸的氨基 - 氨基為連接點,形成-N-糖苷鍵型;以天冬氨酸谷氨酸的遊離羧基為連接點,形成脂糖苷鍵型以及以半胱氨酸為連接點的糖肽鍵。

作用


糖基化對膜蛋白功能影響常常是很重要的,對特異的生物學功能起介導作用:
1,對細胞具有保護、穩定、組織及屏障等多方面作用;
2,可作為外源性受體的特異性配體,某些糖鏈可作為各種病毒、細菌及寄生物的特異性配體;
3,糖鏈也可作為內源性受體的特異性配體,參與介導清除、周轉及胞內穿行作用;
4,糖鏈在受精過程中起著重要的作用。

方法


活細胞中去糖基化的方法:
1,衣黴素在體內阻斷N-連糖; 
2,將內切神經氨酸酶注入發育中的視網膜提示了多唾液酸的特異性作用--將高純度酶注入細胞內+恰當的對照;
3,將糖基修飾酶的cDNA在活細胞或動物中表達; 
4,在培養環境中加入凝集素或抗體把特異的聚糖封閉掉。