活細胞
活細胞
活細胞就是能進行新陳代謝、繁殖、複製的細胞。例如:,血篩管細胞,酵母菌,花粉,精子小板等。活細胞也稱作活化細胞。
活細胞
區分死細胞和活細胞的方法有 ①、活細胞能發生質壁分離而死細胞則不能。②進行培養,活細胞能繁殖,死細胞則不能,光鏡下觀察有多個細胞。③、進行染色,死活細胞呈現不同的結果④、直接觀察細胞結構。
活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之後,細胞膜受損,通透性增加,常用的以台盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。台盼藍,又稱錐藍,是一種陰離子型染料,不能透過完整的細胞膜。所以經台盼藍染色后只能使死細胞著色,而活細胞不被著色,甲基藍有類似的染色機理,植物細胞的質壁分離也可鑒定死活。
採用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料,氧化型為藍色,還原型為無色。由於活細胞中新陳代謝的作用,使細胞內具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型,藍處於氧化態,從而被染成藍色或淡藍色。
熒光素雙醋酸酯(FDA)是一種常用的培養動植物細胞以及植物細胞原生質體的生活力鑒定染料,其染色機理也利用了死活細胞在代謝上的差異:FDA本身不產生熒光,也無極性,能自由滲透出入完整的細胞膜。當FDA進入活細胞后,被細胞內的脂酶分解,生成有極性的、能產生熒光的物質——熒光素,FDA分解,而無法產生熒光。
除此之外,還有一些細胞器的專有染料,如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細胞液泡著紅色,而細胞質和細胞核不被著色;死細胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散於整個細胞中,細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用,如甲基藍-中性紅混合染色法。關於打點計時器 最重要的是不能忘了先接通電源,然後釋放紙帶。
活細胞計數是培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所佔的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復甦后的細胞也要檢查活力,了解凍存和復甦的效果。
用台盼蘭染細胞,死細胞著色,活細胞不著色,從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應,也可測定細胞相對數和相對活力。