二硫橋

本發明涉及以雙鏈形式產生多肽或蛋白質的方法，該方法通過在大腸桿菌中的重組表達，由此ｉ）所述多肽或蛋白質作為雙鏈多肽或蛋白質發揮其功能，ｉｉ）第一鏈的Ｃ末端氨基酸基團是Ａｒｇ或Ｌｙｓ基團，ｉｉｉ）所述蛋白質／多肽的第二鏈在其Ｎ末端具有１－２０個氨基酸基團和稱為ＰＲＳ的五肽序列ＶＰＸＧＳ，其中Ｘ可以是任何天然存在的氨基酸，其中Ｖ代表Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ或Ｇｌｙ，Ｐ代表Ｐｒｏ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ或Ｇｌｙ，Ｇ代表Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ或Ｖａｌ，而Ｓ代表Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ或Ｔｈｒ；以及ｉｖ）所述方法包含以下步驟：ａ）在核酸水平修飾所述多肽或蛋白質，使經修飾形式的該多肽或蛋白質在其環區域包含序列ＶＰＸＧＳ，其中Ｘ、Ｖ、Ｐ、Ｇ和Ｓ如上所定義；ｂ）引入所述在核酸水平修飾的構建體到大腸桿菌細胞中；ｃ）培養並且隨後裂解所述宿主細胞；以及ｄ）分離雙鏈多肽或蛋白質。根據本發明的優選實施方案，所述多肽或蛋白質是肉毒桿菌神經毒素，特別是肉毒桿菌神經毒素（ＢｏＮＴ（Ａ））Ａ型。

申請日： 2006年01月20日

公開日： 2008年01月16日

授權公告日：

申請人/專利權人：比奧泰康醫療有限責任公司

申請人地址：德國波茨坦

發明設計人：沃爾克·施佩希特

專利代理機構：北京市柳沈律師事務所

代理人：封新琴 巫肖南

專利類型：發明專利

分類號： C12N15/70;C12N9/50;C07K14/33;C12N15/57;A61K38/48