免疫學實驗

本書的編寫指導思想是打破傳統實驗教學模式，不受學生專業與層次的限制，以能力培養為主線，推進學生自主學習、研究性學習。完全能夠滿足各層次、各專業免疫學教學的需求。在基礎實驗操作技術中介紹了現代免疫學常用方法技術，例如細胞培養、基因克隆、動物模型的建立等，為創新性實驗提供了鋪墊。在創新性實驗中，提出了有一定覆蓋面和代表性的設計選題範例或方向，寫作手法以啟迪思維為主，但不失指導性與示範性，體現了我們注重學生能力培養所做的探索。臨床免疫實驗中介紹了目前臨床常用的免疫學檢驗方法在疾病診斷、防治中的應用，例如微粒子酶免疫分析技術、電化學發光免疫測定、熒光偏振免疫測定法等。

本教材由教學經驗和實驗室經驗豐富的教師編寫，力求原理講解清楚，方法介紹明白，不少內容是作者的經驗之談。全書約32萬字，插圖57幅。適用於五年制、七年制各專業基礎免疫學和臨床免疫學實驗教學，也可供相關專業的教師、研究生以及從事臨床檢驗、衛生防疫、免疫學研究的實驗技術人員使用。

第一篇 基本實驗操作技術

第1章 血液標本的採集

實驗一 人血液標本的採集

第2章 細胞計數及活性測定

實驗三細胞計數的方法

實驗四 細胞活力測定

第3章 細胞培養

實驗五 細胞培養用器材的準備與無菌操作

實驗六 原代細胞培養

實驗七 細胞傳代培養

實驗八 細胞的凍存與復甦

第4章 動物模型的建立

實驗九 免疫功能低下動物模型

實驗十移植性腫瘤動物模型

第5章　實驗動物給藥方法

實驗十一　實驗動物的捉持與固定

實驗十二　實驗動物的給藥方法

第6章 目的基因的克隆與表達

實驗十三 RT-PCR擴增小鼠IL-2基因

實驗十四 小鼠IL-2原核表達質粒的構建

實驗十五 重組mIL-2的誘導表達及SDS-PAGE鑒定

實驗十六 重組mIL-2的親合層析純化及濃度測定

第二篇 經典驗證性實驗

第7章 凝集反應

實驗十七玻片凝集試驗

實驗十八試管凝集試驗

實驗十九 間接凝集試驗

實驗二十 協同凝集試驗

第8章 沉澱反應

實驗二十一 單向瓊脂擴散

實驗二十二 雙向瓊脂擴散

實驗二十三 對流免疫電泳

實驗二十四 免疫電泳

實驗二十五火箭免疫電泳

實驗二十六 交叉免疫電泳

實驗二十七免疫比濁

第9章 補體參與的免疫反應

實驗二十八 溶血試驗

實驗二十九 血清總補體活性測定

實驗三十 補體依賴的細胞毒試驗

第lO章 免疫標記技術

實驗三十一 酶聯免疫吸附試驗

實驗三十二 酶聯免疫斑點(EILISPOT)技術檢測淋巴細胞分泌活性

實驗三十三 間接免疫熒光法檢測人外周血T細胞亞群

實驗三十四 膠體金的製備

實驗三十五 免疫金的製備

實驗三十六 膠體金斑點層析技術檢測早期妊娠

實驗三十七 中性粒細胞吞噬功能的化學發光測定

第11章 免疫細胞的分離純化

實驗三十八 沉降法分離外周血白細胞

實驗三十九 密度梯度離心法分離外周血單個核細胞

實驗四十 小鼠脾細胞的製備

實驗四十一 小鼠胸腺細胞的製備

實驗四十二 小鼠骨髓樹突狀細胞的製備

實驗四十三 小鼠腹腔巨噬細胞的製備

第12章 吞噬細胞功能測定

實驗四十四硝基四氮唑藍還原試驗

實驗四十五 細菌計數法測定中性粒細胞吞噬功能

實驗四十六巨噬細胞吞噬功能測定

實驗四十七 中性粒細胞趨化功能測定

第13章 超敏反應

實驗四十八 豚鼠過敏反應

實驗四十九 皮膚速髮型超敏反應

實驗五十 血清總IgE測定

實驗五十一 特異性IgE的測定

第三篇 綜合性實驗

第14章 多克隆抗體的製備

實驗五十二 免疫血清的製備

實驗五十三 免疫血清的鑒定與純化

第15章 單克隆抗體的製備

實驗五十四 動物的選擇與免疫

實驗五十五 細胞融合

實驗五十六 雜交瘤的篩選與克隆

實驗五十七 單克隆抗體的製備與鑒定

實驗五十八 單克隆抗體Fab片段的製備

第16章 免疫印跡

實驗五十九 免疫印跡技術

第17章 免疫細胞檢測

實驗六十 溶血空斑試驗

實驗六十一 APAAP橋聯酶標法檢測T細胞亞群

實驗六十二 流式細胞術檢測T細胞亞群

第18章 免疫細胞功能檢測

實驗六十三 淋巴細胞增殖試驗

實驗六十四 混合淋巴細胞反應

買驗六十五 NK細胞活性測定

實驗六十六 細胞毒性T淋巴細胞活性測定

第19章 細胞因子的檢測

實驗六十七 白細胞介素-2活性的檢測

實驗六十八 腫瘤壞死因子的生物學活性檢測

第20章 細胞凋亡的檢測

實驗六十九 凝膠電泳法檢測小鼠胸腺細胞凋亡

實驗七十 末端脫氧核糖核苷酸轉移酶介導的缺口末端標記法檢測細胞凋亡

實驗七十一 流式細胞術檢測細胞凋亡

第四篇 臨床免疫實驗

第21章 感染性疾病的免疫學檢測

實驗七十二 IgM捕獲法檢測TORCH感染特異性IgM抗體

實驗七十三 雙抗原夾心ELISA法檢測人類免疫缺陷病毒抗體

實驗七十四 ELISA法檢測乙型肝炎病毒抗原及特異性抗體

買驗七十五 IgM捕獲法檢測甲型肝炎病毒特異性IgM抗體

第22章 腫瘤標誌物的檢測

買驗七十六 微粒子化學發光免疫法檢測甲胎蛋白

實驗七十七 微粒子化學發光免疫法檢測癌胚抗原

買驗七十八 微粒子化學發光免疫法檢測其他腫瘤相關抗原

第23章 自身免疫性疾病的檢測

買驗七十九 斑點酶免疫法檢測抗ENA抗體

買驗八十 ELISA檢測抗甲狀腺球蛋白抗體

第24章 內分泌疾病的免疫學檢測

實驗八十一 電化學發光免疫法檢測甲狀腺激素

實驗八十二 電化學發光免疫法檢測雌二醇

第25章血液藥物濃度的檢測

實驗八十三 熒光偏振免疫法測定血液環孢素濃度

實驗八十四 熒光偏振免疫法測定血液卡馬西平濃度

實驗八十五 微粒子酶免分析法測定血液地高辛濃度

第五篇 創新性實驗

第26章 實驗的選題、設計、實施與總結

第27章 創新性實驗參考選題

附錄1 常用實驗儀器設備簡介

附錄2 常用試劑配製