孕馬血清促性腺激素
孕馬血清促性腺激素
孕馬血清促性腺激素,即PMSG(Pregnant Mare Serum Gonadotropin)。也稱為馬絨毛膜促性腺激素。它是在懷孕母馬血清中發現的一種激素。並已知在妊娠馬屬動物(驢、斑馬等)都有產生,所以有人稱為馬屬動物絨毛膜促性腺激素(eCG)。
早在40年代,首次證實PMSG,是由妊娠母馬的“子宮內膜杯狀結構”所分泌。近年來研究進一步明確,這種杯狀結構的主體,能分泌PMSG的雙核細胞迅速侵入子宮內膜,內膜先形成皺壁,繼這中央凹陷,邊緣增高,增殖擴散形成腺狀結構,一旦這些細胞脹大變成雙核,即開始分泌PMSG。
影響PMSG分泌量的因素與妊娠時期、動物種類、個體和胎兒遺傳型有關:
①妊娠時期與PMSG在血液中出現,含量多少以及消失都有一定的規律,這種規律與子宮內膜杯的出現、增長和消失是一致的。母馬於妊娠37~40天出現PMSG,55~75天時分泌量達高峰,以後下降,120~150天消失。
②動物個體不同,分泌量有所差異。妊娠母馬個體間PMSG的分泌量在每ml血清中可由10國際單位到250國際單位。分析原因是子宮內膜杯的數目叢不同,產生PMSG的多少也不同;懷雙胎時比懷單胎產量增加1倍;體格大小不同,PMSG血中的相對濃度會有差異,輕型馬比重型馬濃度高;子宮內膜杯消失的快慢也是造成個體間差異的原因。
③胎兒的遺傳型,即胎兒的基因型不同,PMSG的產量不同。經研究證實,胎兒的遺傳型是影響PMSG分泌量最突出的因子。驢懷騾分泌量最高,馬懷馬次之,馬懷騾再次之,驢懷驢最低。
PMSG分子與垂體促性腺激素一樣,也是由α和β亞單位組成,而β亞單位是表現其活性的主要部分。其分子量為53000。由於分子不夠穩定,高溫、酸、鹼條件都易引起失效,同時對它的分離提純工作也較其他糖蛋白激素困難,但是目前通過研究其肽鏈的編碼DNA,已經推出其α、β兩亞基的氨基酸順序。
2.對雄性動物具有促使精細管發育和性細胞分化的功能。
關於PMSG對妊娠母馬本身的確切功能和生物學特性.至今還了解不夠,尚待深入研究論證。
(四)孕馬血清促性腺激素的應用
PMSG是一種經濟實用的促性腺激素。在生產上常用以代替較昂貴的FSH而廣泛應用於動物的誘發發情、超數排卵或增加排卵率(如提高雙羔率);對卵巢發育不全或雄性生精能力衰退等也都可收到一定療效。其應用方法和常用劑量列於表2—4。
應該提出的是,在實踐中進行誘發發情或超數排卵處理時,發現動物個體對PMSG的反應性差異很大,有的個體甚至沒有反應。其原因比較複雜,是否與個體生理狀態不同,或者不同個體產生不同程度的免疫性反應所致,尚有待進一步探討。關於PMSG與PG或hCG等其他激素合用,在胚胎移植中作超排處理的方法、劑量詳見有關章節。
(五)孕馬全血、孕馬血清製備或提取孕馬血清促性腺激素的方法
1.孕馬全血的製備 取500ml玻璃瓶,加入硼砂10g、硫代硫酸鈉5g及蒸餾水30ml,在蒸鍋中滅菌。冷卻至體溫時,采血500ml。在采血過程中,要搖晃瓶子,以防血液凝固。最後用滅菌翻口橡皮塞封好,放陰涼處備用。在普通冰箱內可保存1年以上。
2.孕馬血清的製備 選懷孕50-120天的健康母馬,最好是輕型馬,由頸靜脈采血於滅菌、乾燥的筒狀容器內,於室溫中使血液凝固,析出血清(為了得到更多的血清,可在凝固的血液上加上較重的物體)。最後吸出血清,加入0.5%石炭酸,保存於冷暗處,有效期可達1年左右。
3.PMSG的提純 選懷孕50—90天的的母馬,用無菌手續采血,使自然凝固,分離血清,並加入0.5%石炭酸防腐,保存於4℃冰箱中備用。
提純時,以偏磷酸沉澱蛋白,以苯甲酸吸附孕馬促性腺激素,並以酒精加以沉澱。