凝集試驗

顆粒性抗原與抗體結合后的試驗

顆粒性抗原與相應抗體結合后發生凝集的血清學試驗。抗原與抗體複合物在電解質作用下,經過一定時間,形成肉眼可見的凝集團塊。試驗可在玻板上進行,稱為玻板凝集試驗,可用於細菌的鑒定和抗體的定性檢測;亦可在試管中進行,稱試管凝集試驗,主要用於抗血清效價測定。

原理


凝集試驗顆粒狀抗原(如細菌、紅細胞等)與相應抗體直接結合所出現的凝集現象。分為玻片法和試管法。玻片法是一種定性試驗方法。可用已知抗體來檢測未知抗原。若鑒定新分離的菌種時,可取已知抗體滴加在玻片上,將待檢菌液一滴與其混勻。數分種后,如出現肉眼可見的凝集現象,為陽性反應。該法簡便快速,除鑒定菌種外,尚可用於菌種分型、測定人類紅細胞的ABO血型等。試管法是一種定量試驗的經典方法。可用已知抗原來檢測受檢血清中有無某抗體及抗體的含量。用來協助臨床診斷或供流行病學調查研究。操作時,將待檢血清用生理鹽水連續成倍稀釋,然後加入等量抗原,最高稀釋度仍有凝集現象者,為血清的效價,也稱滴度,以表示血清中抗體的相對含量。

特性


微量抗原與微量抗體結合后,就足以出現肉眼可見的反應。

實現


間接反應

將可溶性抗原(或抗體)先吸附於一種與免疫無關的、一定大小的顆粒狀載體的表面,然後與相應抗體(或抗原)作用。在有電介質存在的適宜條件下,即可發生凝集,稱為間接凝集反應。用做載體的微球可用天然的微粒性物質,如人(O型)和動物(綿羊、家兔等)的紅細胞、活性炭顆粒或硅酸鋁顆粒等;也可用人工合成或天然高分子材料製成,如聚苯乙烯膠乳微球等。由於載體顆粒增大了可溶性抗原的反應面積,當顆粒上的抗原與微量抗體結合后,就足以出現肉眼可見的反應,敏感性比直接凝集反應高得多。

直接反應

細菌或細胞等顆粒性抗原與相應抗體直接反應,出現的凝集現象。主要有玻片法和試管法。玻片法是抗原和相應抗體在玻片上進行的凝集反應,用於定性檢測抗原,如ABO血型鑒定、細菌鑒定等。試管法是在試管中倍比稀釋待檢血清,加入已知顆粒性抗原進行的凝集反應,用於定量檢測抗體,如診斷傷寒病的肥達試驗。試管法凝集反應時,抗原抗體結合出現明顯可見反應的最大的抗血清或抗原製劑稀釋度稱為效價,又稱滴度。

應用


診斷傷寒、副傷寒病的肥達氏反應(Widaltest)、布氏病的瑞特氏反應(Wrighttest)均屬定量凝集反應。