電轉化
電轉化
轉化(electrotransformation),也有人稱作高壓電穿孔法(high-voltage electroproration,簡稱電穿孔法electroproration),可用於將DNA 導入真核細胞(如動物細胞和植物細胞) 和原核細胞(轉化大腸桿菌和其他細菌等)。
目錄
電轉化技術的主要優點在於:對於磷酸鈣DNA共沉澱法以及其他技術難以轉化的細胞,電穿孔法仍可適用。電轉化的效率高,既可用於克隆化基因的瞬間表達,也可用於建立整合有外源基因的細胞系。但是要決定特定細胞系的最佳轉化條件必須進行大量工作。已有商品化的電穿孔裝置如電穿孔儀(electroporationapparatus)(圖6.1),廠商會提供裝置的有關操作規程。如GenepulserElectroporationSystem(Bio-Rad),將兩個或三個簡單脈衝結合成一次脈衝I,有可能利用一次高頻元件起動脈衝,用適當的細菌懸液、抗性參數以及適當的電脈衝持續時間,
可得到較高的轉化率(TyurinM.V.,1992)。