核苷類

具有生理活性的水溶性成分

核苷類是具有廣泛生理活性的一類水溶性成分,余競光等從薄蓋靈芝菌絲體中分離得到五種核苷類化學成分,其中靈芝嘌呤是新化合物。Shimiz等人從赤芝子實體中也得到四種核苷類化合物。

靈芝中核苷類化合物的提取方法一般是將靈芝菌絲體乙醇提取物濃縮后溶於水,依次以乙醚乙酸乙酯萃取,萃 取后的水溶液通過陽離子樹脂處理,流出的溶液及水洗液通過大孔樹脂色譜,得到尿嘧啶核苷尿嘧啶

概念


交換后的陽離子樹脂用NH3H2O處理,依次用乙醇、水洗脫。95%乙醇洗脫部分經硅膠柱色譜及製備薄層色譜得到腺嘌呤腺嘌呤核苷和靈芝嘌呤等。這幾種核苷類的結構如下:
由赤芝孢子粉和薄蓋靈芝菌絲體製成的增肌注射液在臨床上廣泛應用於進行性肌營養不良,萎縮性肌強直等疾病的治療,並有較好的療效。動物實驗證明尿嘧啶和尿嘧啶核苷對實驗性肌強直症小鼠血清醛縮酶有降低作用。SHimizu等人發現腺嘌呤核苷有很強的抑制血小板凝集血小板凝聚的作用和鎮靜、抗缺氧及促進心肌組織攝取86Rb的作用。

藥物分析


方法名稱:四維靈芝液—核苷類成分的測定—高效毛細管電泳法
應用範圍:本方法採用高效毛細管電泳法測定四維靈芝液中的核苷類成分腺苷及鳥苷的含量。
本方法適用於四維靈芝液。
方法原理:取供試品,離心取上清液,加于于處理好的大孔吸附樹脂上,依次以水、30%乙醇洗脫,收集30%乙醇部分,水浴上蒸干,殘渣以水溶解定容,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,濾液作為供試品溶液,注入高效毛細管電泳儀進行電泳分離,用紫外檢測器檢測腺苷鳥苷的相應值,計算其含量。
試劑: 1.乙醇
2 .硼砂
儀器設備: 1 儀器
1.1 高效毛細管電泳儀
1.2 熔融石英毛細管柱(75μm×57cm,有效柱長50cm)
2 分離條件
2.1 運行緩衝液:20nmol/L硼砂(含30mmol/LSDS,pH 10.0) 95%乙醇 = 95 5
2.2 氣動進樣:20psi, 15s
2.3 柱溫:20℃
2.4 檢測波長:254nm
試樣製備: 1.稱取供試品
精密量取四維靈芝液20mL。
2. 對照品儲備溶液的製備
精密稱取腺苷及鳥苷適量,用水為溶劑配製成濃度為0.1mg/L的對照品儲備溶液。
3. 內標溶液的製備
精密稱取內標磺胺甲惡唑適量,用水為溶劑配製成濃度為0.2mg/L的內標溶液
4. 標準溶液的製備
精密吸取對照品儲備溶液各0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、2.0mL,置於5mL量瓶中,各加入內標1mL,加水至刻度,搖勻,得系列濃度的標準溶液。
5.供試品溶液的製備
取供試品,離心取上清液,加于于處理好的大孔吸附樹脂小柱(1.5×11cm)上,依次以水50mL、30%乙醇100mL洗脫,收集30%乙醇部分,水浴上蒸干,殘渣以水溶解定量轉移至5mL量瓶中,加內標液1mL,加水至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,濾液作為供試品溶液,
註:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 1. 標準曲線的繪製
上述系列濃度標準溶液分別注入高效毛細管電泳儀進行電泳分離,以紫外檢測器檢測,檢測波長為254nm,將腺苷及鳥苷的濃度對其峰面積與內標峰面積比繪製標準曲線,進行線性回歸,得到回歸方程
2. 供試品的測定
上述供試品溶液注入高效毛細管電泳儀進行電泳分離,以紫外檢測器檢測,檢測波長為254nm,記錄腺苷及鳥苷的相應值,計算其含量。