粗多糖

（1）、促進雙歧桿菌的增殖：人體雖然不能直接利用粗多糖，但是粗多糖可被腸內細菌利用，並且能促進雙歧桿菌的增殖。雙歧桿菌是一種厭氧革蘭氏陽性細菌，是維護和保持腸道菌群平衡的一個極為重要的因素，也是判斷腸內外環境是否正常的一個可靠依據。

（2）、抑制病原菌：大豆粗多糖能促進雙歧桿菌的增殖，從而抑制有害細菌如產生莢膜梭狀芽孢桿菌的生長。雙歧桿菌能發酵粗多糖產生短鏈脂肪酸和一些抗菌素物質，從而可抑制外源致病菌和腸內固有腐敗細菌的生長繁殖。

（3）、防止便秘、腹脹，促進消化，調節胃腸功能：腸道內的雙歧桿菌發酵粗多糖產生大量的短鏈脂肪酸（主要是醋酸和乳酸），能刺激腸道蠕動，從而促進消化，防止便秘的產生。

（4）、增強免疫功能：如果人較長期的食用無細菌食物，腸道就會因為缺少刺激而使其產生抗體的能力下降，從而容易誘發疾病。食用粗多糖，促進雙歧桿菌的增殖，將對腸道免疫細胞產生刺激，提高其產生抗體的能力從而起到防治疾病的效果。

1.原理

分子量大於10，000道爾頓的多糖經80%乙醇沉澱后，加入鹼性銅試劑，選擇性地從其他高分子物質中沉澱出葡聚糖，沉澱部分與苯酚-H2SO4反應，生成有色物質，在485nm條件下，有色物質的吸光度值與葡聚糖濃度成正比。

2.適用範圍

參照AOAC方法。適用於檢測含有分子量大於10，000道爾頓葡聚糖的樣品。

3.儀器

（1）分光光度計

（2）離心機

（3）旋轉混勻器

（4）恆溫水浴鍋

4.試劑

除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。

（1） 80%乙醇：800ml無水乙醇加水200ml。

（2） 2.5 mol/L NaOH溶液：100 g NaOH加 蒸餾水稀釋至1 L，加入固體無水硫酸鈉至飽和。

（3）銅貯存液：稱取3.0 g CuSO4 ·5H2O，30.0 g檸檬酸鈉加水溶解至1 L。溶液可貯存2周。

（4）銅應用溶液：取銅貯存液50 ml，加水50 ml混勻后加入 無水硫酸鈉12.5 g，臨用新配。

（5）洗滌液：取水50 ml，加入10 ml銅應用溶液，10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液，混勻。

（6） 1.8 mol/L H2SO4：取100ml濃硫酸用水稀釋至1L。

（7） 20 g/L苯酚溶液：稱取2.0g苯酚，加水溶解並稀釋至100ml，混勻備用。

（8）葡聚糖標準液：稱取500mg葡聚糖（分子量500,000D）於稱量皿中，105℃乾燥4h至恆重，置於裝有乾燥硅膠的乾燥器中冷卻。準確稱取100mg乾燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖標準濃度為1.0mg/ml。

（9）葡聚糖標準應用液：吸取葡聚糖標準液10ml，用水稀釋10倍，葡聚糖終濃度為0.1mg/ml。

5. 操作方法

5.1 樣品處理

（1）樣品提取：稱取樣品1～5g，加水100ml，沸水浴加熱2h，冷卻至室溫，定容至200ml（V1），混勻後過濾，棄初 濾液，收集餘下濾液。

（2）沉澱高分子物質：準確吸取上述濾液100ml（V2），置於燒杯中，加熱濃縮至10ml，冷卻后，加入無水乙醇40ml，將溶液轉至離心管中以3000rpm離心5min，棄上清液，殘渣用80%乙醇洗滌3次，殘渣供沉澱葡聚糖之用。

（3）沉澱葡聚糖：上述殘渣用水溶解，並定容至50ml （V3），混勻後過濾，棄初始 濾液后，取濾液2.0ml（V4），加入2.5mol/L NaOH2.0ml，Cu應用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷卻后以3000rpm離心5min，棄上清液，殘渣用洗滌液洗滌3次，殘渣供測定葡聚糖之用。

（4）測定葡聚糖：上述殘渣用2.0mL 1.8mol/LH2SO4溶解，用水定容至100mL（V5）。準確吸取2.0ml（V6），置於25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml濃硫酸，沸水浴煮沸2分鐘，冷卻比色。從 標準曲線上查得相應含量，計算粗多糖含量。

5.2 標準曲線製備：

精密吸取葡聚糖標準應用液0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00ml（分別相當於葡聚糖0.01，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.15，0.20mg），補充水至2.0mL，加入苯酚溶液1.0ml，濃硫酸10ml，混勻，沸水浴2分鐘，混勻，沸水浴2分鐘，冷卻後用分光光度計在485nm 波長處以 試劑空白溶液為參比，測定 吸光度值（A），以葡聚糖濃度為橫坐標，A為縱坐標繪製 標準曲線。

6.計算

從 標準曲線上查得樣品相應含量，計算粗多糖含量。

公式中：c--從標準曲線上查得樣品測定管中葡聚糖含量，mg；

V1--樣品提取時定容體積，ml；

V2--沉澱高分子物質取液量，ml；

V3 --沉澱 葡聚糖時定容量，ml；

V4 --沉澱葡聚糖時取液量，ml；

V5 --測定葡聚糖時定容體積，ml；

V6 --樣品比色管中取樣液體積，ml；

m--樣品稱量質量，g；

0.1--將mg/g 換算成g/100g 的係數。

7.注意事項

（1）苯酚-H2SO4溶液可以和多種 糖類進行 顯色反應，常用於 總糖的測定。所以測定過程中應注意容器及試劑中其他糖類的干擾。

（2）苯酚-H2SO4溶液和不同類的糖反應，顯色的強度略有不同，反映在 標準曲線的斜率不同。如果已知樣品中糖的結構，應盡量以同類糖的純品做標準品，或以含有已知濃度的同類產品做對照品進行檢測分析；如果樣品中糖的類型未知或結構多樣，則只能以 葡萄糖計或其他糖計報告結果。

（3）試驗證明葡萄糖、果糖等單糖，蔗糖、乳糖等雙糖、低聚糖-- 棉子糖，澱粉、糊精等多糖及甜味劑糖精不干擾粗多糖測定。

（4）本方法由北京市衛生防疫站建立，經中國預防醫學科學院營養與食品衛生研究所驗證。

粗多糖是指複合型雜多糖，主要有黏多糖、脂多糖、結合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨著科技的發展，粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。

粗多糖的降血糖和防治糖尿病作用

糖尿病是一組以高血糖為特徵的綜合症。研究表明，粗多糖有顯著的降血糖作用，用於糖尿病的輔助治療，所有患者癥狀均有明顯好轉。其降血糖機制主要有提高肝臟抗氧化能力，增強肝葡萄糖激酶活性。因此，粗多糖可用於保健食品及糖尿病的輔助治療。

粗多糖的降血脂作用

大量研究表明，粗多糖能降低血漿總膽固醇，對抗實驗性高膽固醇血症的形成，使高脂血症的血漿總膽固醇、甘油三酯、LDL(低密度脂蛋白膽固醇)及中性脂下降，HDL(高密度脂蛋白膽固醇)上升。而HDL被認為是對機體有益的，因為它能增強膽固醇通過肝臟的排泄。粗多糖還能與脂蛋白酯酶結合，促進動脈壁脂蛋白酯酶入血而粗多糖抗血凝、抗血栓作用

血栓形成主要包括三個階段

(1)血小板粘附和聚集;

(2)血液凝固;

(3)纖維蛋白溶解。

研究表明，粗多糖能明顯抑制血小板的粘附作用，並降低血液粘度，直接影響血栓形成的第一階段;粗多糖在體內、體外均有顯著的抗凝作用，並減少血小板數，延長血凝從而也影響到血栓的形成;另外，粗多糖能提高纖維蛋白溶解的活力，起到溶解血栓的作用。由此可見，粗多糖能作用於血栓形成的所有環節。

粗多糖的增強機體免疫功能

粗多糖能夠促進單核巨噬細胞系統吞噬功能，增強機體自我保護的能力，有效的增強了機體體液免疫作用。大量藥理和臨床研究已發現，天然粗多糖對機體免疫功能的影響方式和途徑主要有3種：(1)激活巨噬細胞;(2)激活網狀內皮系統，生物體內的網狀內皮系統具有吞噬、排除老化細胞和異體及病原體的作用;(3)激活T和B的淋巴細胞。