接種

微生物學術語：接種inoculation，按無菌操作技術要求將目的微生物移接到培養基質中的過程。

食用菌栽培學術語：接種inoculation，將食、藥用菌菌種移植在培養基物中的方法、過程。也叫“播種spawning”。

接種是食用菌生產中的關鍵環節之一，也叫做播種。如果接種技術不過關，即會造成雜菌污染，成活率低而前功盡棄，更談不上栽培了。無論是菌種分離、傳代還是擴繁，都要在無菌條件下嚴格按照無菌操作規程進行。具體要點如下：

1人員素質

1.1接種人員要具備認真、細緻、自覺、對事業負責的精神。

1.2接種人員要牢固樹立無菌觀念，不能存在僥倖心理，切不可麻痹大意。

1.3接種人員具備鑒別菌種優勢的能力，不合格的菌種不能用於生產。

2環境消毒

2.1新製作的或是閑置時間超過15天的接種箱，首次使用前，箱體內、外需用0.1%升汞水或2%來蘇兒徹底刷洗消毒。

2.2閑置超過30天的接種室和緩衝間重新使用前，牆壁需用2%來蘇兒噴濕消毒。對新改建或閑置3個月以上沒用的接種室，使用前，室內牆壁要用石灰漿粉刷，水泥地面用清水沖刷。

3空間消毒

將待接種的培養基放入接種箱或接種室后，需對箱或室內進行空間消毒。

3.1如果是母種傳代或接種量少的原種，可利用接種箱同時放入所用的接種工具，然後用化學藥物熏蒸或紫外線照射進行空間消毒30分鐘。

3.2如果是量大的原種或三級種生產，培養基放入接種室，同時放入所用的接種工具，再用化學藥物熏蒸，同時配合紫外線照射進行空間消毒40分鐘左右。

3.3緩衝間內放置作業服、消毒水、面盆等，接種前要在緩衝間內做好一切準備工作。進入前開啟紫外線燈照射30分鐘，離開緩衝間進入接種室時仍需開啟紫外線燈照射，直至接種結束。

4攜帶物消毒

4.1將母種試管或原種瓶（袋）的棉塞齊管或瓶口剪去，母種試管用75%酒精棉擦洗外壁，原種瓶（袋）用0.25%高錳酸鉀水清洗外壁，然後隨接種人員帶入接種箱（室）。

4.2接種人員經過緩衝間更衣、洗手進入接種室后不得隨便出入，盡量少走動和避免空氣對流。

5殺菌

利用酒精火焰進行必要的殺菌。

5.1首先將接種工具（鉤、鏟、刀等）在酒精燈火焰上燒灼后，置於清潔的空試管內冷卻備用。

5.2將試管母種或原種瓶放在萬能夾上，旋轉式取下棉塞，右手端起酒精燈，讓火焰接觸管口或瓶口，左手將試管或原種瓶慢慢旋轉3～4周，然後將試管或原種瓶固定牢。

6接種

母種分離、傳代或擴繁時，試管口要控制在離酒精火焰10cm範圍內進行操作。

6.1用殺菌后的備用接種鉤，除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊，隨後將接種鉤放回母種試管。左手持預接種的試管培養基，管口稍向下傾斜，用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤，從母種試管內鉤取直徑約2mm大小的種塊，放入預接種培養基斜面中央，抽出接種鉤，放回母種試管，輕燎右手所持棉塞，旋轉式塞入接過菌的試管，由右手放到適當位置，連續完成所有預接種試管。

注意：①每次接種時間最長不得連續超過2小時。②操作時，接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具，種塊碰到外面物體則作廢。③一般用種量：每支試管母種可擴繁一級種100支左右；擴接原種6～8瓶。

6.2原種接栽培袋的方法

菌種處理。一是入接種室前用75%的酒精或其它殺菌藥劑將菌種袋（瓶）擦洗一遍。二是接種前再用75%的酒精將菌種袋擦一遍。三是接種時從瓶（袋）底開始接，上部留1——2公分不用。

操作規範。一是接種必須3人一班，一人運袋擦袋，一人打眼封口，一人接入菌種。二是接種速度要敏捷，隨打眼，隨接種，隨封口。三是接種時間安排在晚上九點以後或陰天，以免灰塵大增加污染。四是短時間內一次接完，接完后再用氣霧消毒劑薰蒸一次。

7兩種特殊接種法

7.1密環菌傳代擴繁時，要趁培養基有凝結水時進行，接人種塊直徑不能小於0.5mm，同時還要帶有菌索。每支試管培養基可同時接入3塊母種，每塊母種都要用接種工具按壓至母種塊陷入培養基約2mm，以利菌索儘快伸入培養基；接種原種時，每支試管可接種原種3～4瓶。

7.2元蘑菌傳代擴繁時，種塊直徑不能小於0.3mm。接種時，將種塊從試管培養基尾部約1.5cm處順斜面中間縱向劃線至斜面尖端約2cm處放下種塊，此法可使培養周期縮短3天左右。

8安全

8.1點燃的酒精燈不能靠近棉塞、塑料等易燃物。

8.2點燃的酒精燈要放牢，在操作過程中嚴防將酒精燈碰翻，以免引起火災。

8.3接種箱或接種室利用化學藥物進行空間消毒時，要計算空間容積，按照用藥說明使用，不許任意加大用藥量，避免造成藥害。

8.4紫外線可損傷人體，特別是可引起電光性眼炎。因此，不要在開啟紫外線燈的情況下工作，更不能直視正在開啟的紫外線燈。

方法

1.左手持皿用拇指、食指和中指將皿蓋揭開約20-30度左右，角度越小遭空氣污染的可能性越小，並靠近酒精燈附近操作。

2.右手持接種環，先在酒精燈滅菌，然後取菌液，將沾菌接種環在培養基的邊緣划原始線，而後使接種環在指力作用下作輕快的滑移動作，從培養皿的一個邊緣滑向另一個邊緣，滑動時用力要均勻，切勿將接種環嵌入培養基內。