接種

微生物術語

接種是微生物學術語和食用菌栽培學術語。接種是食用菌生產中的關鍵環節之一,也叫做播種。

簡介


微生物學術語:接種inoculation,按無菌操作技術要求將目的微生物移接到培養基質中的過程。
食用菌栽培學術語:接種inoculation,將食、藥用菌菌種移植在培養基物中的方法、過程。也叫“播種spawning”。

食用菌栽培


接種[微生物術語]
接種[微生物術語]
接種是食用菌生產中的關鍵環節之一,也叫做播種。如果接種技術不過關,即會造成雜菌污染,成活率低而前功盡棄,更談不上栽培了。無論是菌種分離、傳代還是擴繁,都要在無菌條件下嚴格按照無菌操作規程進行。具體要點如下:
1人員素質
1.1接種人員要具備認真、細緻、自覺、對事業負責的精神。
1.2接種人員要牢固樹立無菌觀念,不能存在僥倖心理,切不可麻痹大意。
1.3接種人員具備鑒別菌種優勢的能力,不合格的菌種不能用於生產。
2環境消毒
2.1新製作的或是閑置時間超過15天的接種箱,首次使用前,箱體內、外需用0.1%升汞水或2%來蘇兒徹底刷洗消毒。
2.2閑置超過30天的接種室和緩衝間重新使用前,牆壁需用2%來蘇兒噴濕消毒。對新改建或閑置3個月以上沒用的接種室,使用前,室內牆壁要用石灰漿粉刷,水泥地面用清水沖刷。
將待接種的培養基放入接種箱或接種室后,需對箱或室內進行空間消毒。
3.1如果是母種傳代或接種量少的原種,可利用接種箱同時放入所用的接種工具,然後用化學藥物熏蒸或紫外線照射進行空間消毒30分鐘。
3.2如果是量大的原種或三級種生產,培養基放入接種室,同時放入所用的接種工具,再用化學藥物熏蒸,同時配合紫外線照射進行空間消毒40分鐘左右。
3.3緩衝間內放置作業服、消毒水面盆等,接種前要在緩衝間內做好一切準備工作。進入前開啟紫外線燈照射30分鐘,離開緩衝間進入接種室時仍需開啟紫外線燈照射,直至接種結束。
4攜帶物消毒
4.1將母種試管或原種瓶(袋)的棉塞齊管或瓶口剪去,母種試管用75%酒精棉擦洗外壁,原種瓶(袋)用0.25%高錳酸鉀水清洗外壁,然後隨接種人員帶入接種箱(室)。
4.2接種人員經過緩衝間更衣、洗手進入接種室后不得隨便出入,盡量少走動和避免空氣對流。
5殺菌
利用酒精火焰進行必要的殺菌。
5.1首先將接種工具(鉤、鏟、刀等)在酒精燈火焰上燒灼后,置於清潔的空試管內冷卻備用。
5.2將試管母種或原種瓶放在萬能夾上,旋轉式取下棉塞,右手端起酒精燈,讓火焰接觸管口或瓶口,左手將試管或原種瓶慢慢旋轉3~4周,然後將試管或原種瓶固定牢。
6接種
接種[微生物術語]
接種[微生物術語]
母種分離、傳代或擴繁時,試管口要控制在離酒精火焰10cm範圍內進行操作。
6.1用殺菌后的備用接種鉤,除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊,隨後將接種鉤放回母種試管。左手持預接種的試管培養基,管口稍向下傾斜,用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤,從母種試管內鉤取直徑約2mm大小的種塊,放入預接種培養基斜面中央,抽出接種鉤,放回母種試管,輕燎右手所持棉塞,旋轉式塞入接過菌的試管,由右手放到適當位置,連續完成所有預接種試管。
注意:①每次接種時間最長不得連續超過2小時。②操作時,接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具,種塊碰到外面物體則作廢。③一般用種量:每支試管母種可擴繁一級種100支左右;擴接原種6~8瓶。
6.2原種接栽培袋的方法
菌種處理。一是入接種室前用75%的酒精或其它殺菌藥劑將菌種袋(瓶)擦洗一遍。二是接種前再用75%的酒精將菌種袋擦一遍。三是接種時從瓶(袋)底開始接,上部留1——2公分不用。
操作規範。一是接種必須3人一班,一人運袋擦袋,一人打眼封口,一人接入菌種。二是接種速度要敏捷,隨打眼,隨接種,隨封口。三是接種時間安排在晚上九點以後或陰天,以免灰塵大增加污染。四是短時間內一次接完,接完后再用氣霧消毒劑薰蒸一次。
7兩種特殊接種法
7.1密環菌傳代擴繁時,要趁培養基有凝結水時進行,接人種塊直徑不能小於0.5mm,同時還要帶有菌索。每支試管培養基可同時接入3塊母種,每塊母種都要用接種工具按壓至母種塊陷入培養基約2mm,以利菌索儘快伸入培養基;接種原種時,每支試管可接種原種3~4瓶。
7.2元蘑菌傳代擴繁時,種塊直徑不能小於0.3mm。接種時,將種塊從試管培養基尾部約1.5cm處順斜面中間縱向劃線至斜面尖端約2cm處放下種塊,此法可使培養周期縮短3天左右。
8安全
8.1點燃的酒精燈不能靠近棉塞、塑料等易燃物。
8.2點燃的酒精燈要放牢,在操作過程中嚴防將酒精燈碰翻,以免引起火災。
8.3接種箱或接種室利用化學藥物進行空間消毒時,要計算空間容積,按照用藥說明使用,不許任意加大用藥量,避免造成藥害
8.4紫外線可損傷人體,特別是可引起電光性眼炎。因此,不要在開啟紫外線燈的情況下工作,更不能直視正在開啟的紫外線燈。

微生物接種


接種
接種
方法
1.左手持皿用拇指、食指和中指將皿蓋揭開約20-30度左右,角度越小遭空氣污染的可能性越小,並靠近酒精燈附近操作。
2.右手持接種環,先在酒精燈滅菌,然後取菌液,將沾菌接種環在培養基的邊緣划原始線,而後使接種環在指力作用下作輕快的滑移動作,從培養皿的一個邊緣滑向另一個邊緣,滑動時用力要均勻,切勿將接種環嵌入培養基內。