原代細胞
從機體取出后立即培養的細胞
原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用於分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用於當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌症藥物的研究等。原代細胞在生物醫藥領域有不可替代性作用,市場前景廣闊。
動物組織經胰蛋白酶等消化、分散,獲得單個細胞,再生長於培養皿中。大多數組織可以製備原代細胞,但生長的快慢及難易程度不一。腎和睾丸最常用,甲狀腺細胞生長較慢,只用於某些特定的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養。
原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。但實際上,通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。
最常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。
組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入培養基後進行培養。
分散細胞培養大致步驟為:
將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。