變數試驗(fluctuation test)又稱波動試驗或彷徨試驗。1943年,Luria和 Delbrück據統計學的原理。
實驗中,為了證實原始敏感大腸桿菌並沒有
噬菌體的個體存在,可以取一定濃度
敏感菌加到含有噬菌體的平皿上,作為對照(From:《
工業微生物育種學》
取對噬菌體T1敏感的
大腸桿菌對數期肉湯培養物,用新鮮培養液稀釋成濃度為10^3/ml的細菌懸液,然後在甲、乙兩
試管中各裝10ml。接著把甲管中的菌液先分裝在50支小試管中(每管裝0.2ml),保溫24~36小時后,即把各小管的菌液分別倒在50個預先塗有T1的平板上, 經培養後計算各皿上所產生的抗噬菌體的菌落數;乙管中的10ml菌液不經分裝先整管保溫24 ~ 36小時,然後才分成50份加到同樣塗有噬菌體的平板上,適當培養后,同樣分別計算各皿上產生的抗性菌落數。?
變數試驗
來自甲管的50皿中,各皿間抗性菌落數相差極大(圖,左),而來自乙管的則各 皿數目基本相同(圖,右)。這就說明,?
E.coli抗噬菌體性狀的突變,不是由所抗的環境 因素— —噬菌體誘導出來的,而是在它接觸到噬菌體前,在某一次
細胞分裂過程中隨機地自發產生的。這一
自發突變發生得越早,則抗性菌落出現得越多,反之則越少,噬菌體在這裡僅起著淘汰 原始的未突變的敏感菌和鑒別抗噬菌體突變型的作用。利用這一方法,還可計算出
突變率。 ?