血葯濃度

臨床實踐中常常發現這樣一種現象，同樣劑量的藥物用於患同種疾病的不同病人，其療效往往相差很大，有的表現為藥到病除，恰到好處；有的療效一般，病況稍見好轉；而有的卻療效不好。其毒副作用表現也不一樣，有的幾乎無副作用或輕微；有的卻嚴重中毒。這是因為存在著個體差異（年齡、性別、機體狀況、遺傳、種族等）。例如，用苯妥英鈉治療驚厥和心律失常，其最適治療劑量在不同的人身上變化很大。用常用量治療時，其血葯濃度變動較大，有的人低到只有2毫克/升，根本無療效；有的人卻高達50毫克/升，病人嚴重中毒。

為了做到合理用藥，科學家們做了大量實驗，發現這樣一個有意義的現象：不同的人，其有效的藥物劑量變動很大，但是其安全有效的血葯濃度變動卻較小。一般不過1倍左右。當血葯濃度大於安全有效範圍，其毒副作用和表現及其程度在不同病人身上變動也較小。再舉苯妥英鈉的例子，該葯的安全有效血濃度範圍在幾乎所有病人均為10～20毫克/升。同樣當苯妥英鈉的血濃度超過安全範圍，幾乎所有病人都出現中毒反應。當血葯濃度為20～30毫克/升時，病人則出現精神異常現象。

對那些有效濃度與中毒血濃度比較接近的藥物（如洋地黃類），以及對那些長期用藥或合併用藥的病人，為防止藥物在體內濃度過高而產生毒副作用，應該經常測定血葯濃度。

如今，一些有條件的醫院對病人除掌握藥物的劑量和給葯的次數以外，還常常測定血葯濃度，以便指導臨床選擇適合不同個體的最佳治療方案和最合適的治療劑量。

目前血葯濃度監測的方法很多，最常用的有光譜法、色譜法、免疫法3大類。

該類方法有比色法、紫外-可見分光光度法、熒光法等。這類方法靈敏度比較低，只能監測體液中藥物質量濃度在1.0μg·L-1以上的藥物，並且代謝物或結構相近化合物對監測的干擾較大。在所查文獻中，採用雙波長紫外分光光度法監測血中氨茶鹼濃度的最小檢測限為0.5μg·mL-1，苯妥英鈉的最低檢測限為5μg·mL-1。儘管採用差示分光光度法、導數分光光度法等來提高方法的專一性，減少了雜質的干擾，但並不能提高該類檢測方法的靈敏度。另外，應用這類方法所需樣品量大，尤其象差示分光光度法所需樣品量更大。以上缺點限制了該類方法在血葯濃度監測中的應用。尤其近年來色譜技術的發展，使得光譜法因其靈敏度、特異性等局限而使得其應用逐漸減少。但對於藥物濃度較高的體液樣品或樣品量較大的樣品，該類方法仍是經濟、簡便、快捷的監測方法。

色譜法目前是發展最快、適用性最強的一種方法。這類方法較光譜法最大的優勢就是它不僅具有優越的定量作用，更具有一次分離多種樣品的作用，加之這種方法靈敏度高，能夠測到的藥物質量濃度可達0.001～1μg·mL-1，尤其是近年來質譜的發展使得監測範圍更加擴展，達到1.0×10-9～1.0×-6μg·mL-1甚至更低。

（1）高效液相色譜(HPLC)法

HPLC法是目前臨床上用於監測血葯濃度最常用的方法，在所查文獻中，採用HPLC法監測抗癲癇藥物的血葯濃度在所有方法中達到80%以上。這種方法檢測靈敏度、精密度高，專一性強。並且HPLC法應用範圍廣，可用於藥物研究的很多領域，目前已越來越普及，但這種方法對樣品的前處理要求非常高，主要是因為色譜柱做為分離、分析樣品的重要載體，對進行分析的樣品純凈度要求非常高，大分子蛋白質及其他大分子物質必須處理完全，以最大程度地減少對分析柱的柱效的影響，延長色譜柱的使用時間。

HPLC操作費時，費用相對較高。目前針對色譜及光譜分析中樣品處理繁瑣的難題，已有色譜工作人員成功開發出了在線凈化富集生物體液的填料柱，在進行樣品監測時無需預處理，蛋白質等大分子物質經洗脫而不被保留，而小分子物質可自由出入於固定相的疏水部分而得到分析。這一方法省時省力，近年來國內外在HPLC系統中已廣泛採用SPE柱從而使得體液分析方法大為簡化，但這種處理增加了樣品監測的成本。液-質聯用技術的發展為樣品分析提供了廣闊的空間，質譜的聯用為色譜的進一步發展提供了更為靈敏、準確的技術支持，在很大程度上擴展了高效液相色譜的應用範圍，如監測血清中替米沙坦的濃度時，單用高效液相色譜法監測時，最低檢測限為20μg·L-1，但當應用液-質聯用進行監測時，可將靈敏度提高到0.5μg·L-1。

（2）氣相色譜(GC)法

GC法具有高選擇性、高靈敏度、取樣少、分析速度快、應用範圍廣，而且可製備高純物質等。氣相色譜法的缺點是要求被測組分或其衍生物必須具有一定的揮發性和熱穩定性，因此遇熱不穩定或極性大的樣品無法實現GC的監測。目前隨著固定相的發展以及衍生化技術的應用，使很多樣品的監測不再受限制。但氣相色譜儀在體內藥物分析中的應用相對較少。

（3）薄層色譜法

薄層色譜法是將樣品在層析板上進行分離，然後對分離樣品進行定量的一種色譜方法。這種方法的靈敏度及重複性比HPLC和GC法要差，而且操作步驟較多，在實際應用中受到限制。但這種方法操作簡單，能滿足一般藥物的濃度監測要求。另外，20世紀末發展起來的高效毛細管電泳法，由於其高效分離技術和高靈敏度，在藥物分析和體內藥物分析中逐漸引起重視，但總的來說應用於監測血葯濃度方面的報道較少。

目前採用免疫法監測藥物濃度主要是利用蛋白競爭的原理進行監測的。從目前的所查文獻看，放射免疫法，酶免疫法、熒光免疫法是較常用於血葯濃度監測的方法，國外監測血葯濃度多以熒光偏振免疫法(FPIA法)、均相酶免疫法(EMIT)為主，這類方法樣品處理簡單，獲取結果時間較短，已成為臨床用於評判療效的一個重要依據。該類儀器多由國外研發，價格較貴，且僅局限於其研發后所能監測的藥物。但該類儀器仍因其獲取結果快速、樣品處理簡單、靈敏度高而受到臨床的重視。