黏粒

黏粒

由於真核基因的結構與功能研究的需要,人們發展出比λ噬菌體載體具有更大克隆能力的新型的載體--柯斯質粒載體(osmidVetors,cosmid 是cos site carrying plasmid的縮寫),也稱為黏性質粒或黏粒。這是一類人工構建的含有抗性基因、單一克隆位點以及入DNACOS位點(體外包裝所必需) 的細菌質粒。黏粒DNA 和外源DNA酶切后,需在較高濃度下連接,使兩個COS 位點之間有一個完整的質粒序列。當體外包裝時,帶有外源DNA 的重組黏粒在COS 位點上被切開,包裝成為成熟的噬菌體顆粒。這樣,噬菌體顆粒在感染菌體內重組DNA 通過噬菌體的黏端而環化,並可以在宿主內自我複製,表達抗性標記。

基本介紹


黏粒英文cosmid,指帶有黏端位點(cos)的質粒。黏粒是由人工構建的含有λ噬菌體DNA的cos序列和質粒複製子的載體。黏粒的組成包括質粒複製起點(ColE1)、氨苄青霉素抗性標記、cos位點。
黏粒有4個特點:①具有λ噬菌體的特性。黏粒在克隆了外源DNA在體外包裝成噬菌體顆粒后,可以感染宿主菌並在細菌內按照λ噬菌體DNA的方式環化起來。但黏粒載體不含有λ噬菌體的全部必要基因,因此不會使宿主菌裂解,無法形成子代噬菌體顆粒。②具有質粒的特性。黏粒具有質粒複製子,可在宿主菌內像質粒DNA一樣進行複製。③克隆外源DNA的容量大。黏粒自身相對較小,一般只有5~7kb,而最大的克隆片段可達45 kb左右。④能與有同源序列的質粒進行重組