生物化學技術

生物化學技術

biochemical techniques

用於生物化學大分子研究的獨特的分析、製備實驗技術，這些實驗方法也是深入闡明疾病分子機理的重要手段。

沒有超速離心技術的發展，具有生物學活性的亞細胞組分的分離是不可能的。電泳方法是一類重要的生物化學技術，現在不僅能借電泳以分離製備較大規模的生物大分子，還能從單一樣品中，分辨出成百上千的不同蛋白質組分或核酸片段。毛細管電泳的問世，更使分析微量化到1nl水平。在臨床醫學中，電泳可幫助分析各種脂蛋白成分，使各種高脂蛋白血症得以區別；以電泳分析同工酶成分或酶譜，得以區分其所來源的病變組織或疾病的不同發展階段。基因重組技術在生物科學中已掀起一場劃時代的革命。現在在實驗室里就可隨意剪切拼接基因，可人工合成基因，並將其引入細胞中以指導合成相應的新蛋白質，改變細胞的遺傳性狀。臨床上已應用基因探針以診斷某些遺傳性疾病、惡性腫瘤和乙型肝炎等。

生物化學實驗技術的主要特點是：①操作溫和，使對所研究組分的天然結構和功能的損害，儘可能減少至最小。②微量或痕量分析，低達ng或pg水平；或大量分離製備，高達公斤級。③解析度高，可明確區分結構或性質極其相似的物質。

重要的現代生物化學實驗技術，按其目的和性質大致可分為三大類。

一是按不同的物理化學性質進行分析鑒定和分離製備，其中又可分為五類：①根據分子的大小進行分辨者，有凝膠過濾法、超速離心法、超濾法、 SDS電泳分析等。②根據分子荷電情況進行分辨者，有等電聚焦電泳法、離子交換層析法等。③根據吸收光譜和放射性等性質進行分辨者，有紫外/紅外/熒光分光光度法、X射線結構分析法、電子順磁共振，電子自旋共振和核磁共振法，以及放射性核素示蹤和放射免疫分析法等。④根據疏水相互作用或氫鍵形成的引力進行分辨者，有反相高效液相層析、分子雜交技術等。⑤根據特異相互作用進行分辨者，有親和層析、免疫化學分析法等。

二是經一系列不同的化學和物理方法處理，以求得差異分辨，或按指令合成不同的高分子物質。如氨基酸序列分析和序列合成、核苷酸序列分析和序列合成等。

三是有目的地對 DNA進行剪切拼接，引入細胞中的（或分子克隆技術）和等。

為使這些生物化學技術實現高效自動化、靈敏精確重複性好、特異性高，人們設計了一系列有微機控制的高性能儀器，使生物化學實驗技術更臻完美。必須強調指出的是，技術方法是十分重要的實驗手段，但更重要的是科學家運籌帷幄的戰略設計。只有巧妙地利用不同的生物化學實驗技術，方能達到預期的研究目的。